课下能力提升(八)
[基础题组]
1.动物细胞融合主要的用途是( )
A.克服远缘杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂交细胞
解析:选B 植物体细胞杂交技术主要是为了克服远缘杂交不亲和,以培育新物种。另外,动物细胞作为整体,它的全能性受到限制,目前只见到高度分化的细胞核在去核卵母细胞中表现出全能性,还未见到融合细胞表现出全能性的例子,因此动物细胞融合不能用来培育新物种。生产杂交细胞,不是细胞融合的主要目的,杂交细胞只是细胞融合完成后所形成的结构的名称。
2.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( ) A.制备过程中不需要动物细胞培养技术
B.杂交瘤细胞具有B淋巴细胞与癌细胞的所有特点
C.经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产 D.单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂
解析:选D 单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后获得所需杂交瘤细胞,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得到单克隆抗体;杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。
3.利用动物细胞融合技术可以获得杂交瘤细胞,下列针对单个杂交瘤细胞的叙述,错误的是( ) A.需经筛选过程方可获得 B.具有双亲细胞的遗传物质 C.可分泌多种特异性抗体 D.体外培养条件下可大量繁殖
解析:选C 由单个杂交瘤细胞获得的抗体是单克隆抗体,其抗体只有一种。
4.如图是两种生物细胞融合技术的示意图,关于该图的有关叙述,完全正确的一组是( )
①a过程必须除去细胞膜;b过程需要通过细胞识别
②若X是抗体,则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B淋巴细胞
③若X是苹果梨幼苗,则c过程是细胞分裂、分化④细胞融合技术的缺点是不能克服远缘不亲和性
A.① B.①②
C.②③ D.②③④
解析:选C 动物细胞融合不需要去除细胞膜,两个细胞的细胞膜融合可以不需要识别,①错误;若X是抗体,则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B淋巴细胞,二者融合后的杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生专一抗体,②正确;若X是苹果梨幼苗,则甲、乙细胞是苹果细胞和梨细胞,c过程是细胞分裂、分化,
③正确;细胞融合技术打破了生殖隔离,克服了远缘杂交不亲和的障碍,④错误。
5.以下关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较,正确的是( )
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞
A.①②B.①③C.②④ D.③④
解析:选C 植物体细胞杂交诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法,动物细胞融合的诱导方法有物理法、化学法和生物法,①错误;所用的技术手段不相同,植物体细胞杂交还需要采用植物组织培养技术,而动物细胞融合不需要,②正确;所采用的原理不完全相同,植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的
全能性,而动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性,③错误;两者都能形成杂种细胞,④正确。
6.下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤,其中对单克隆抗体制备的相关叙
述,错误的是( )
①将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞
②从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞③利用促细胞融合因子使细胞发生融合
④将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养
⑤筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞
⑥从腹水中提取抗体
A.实验顺序应该是①②③⑤④⑥
B.④过程中产生的多个杂交瘤细胞也为克隆
C.③过程获得的细胞均可无限增殖
D.③~⑤的过程中通常要经过两次筛选
解析:选C 利用促细胞融合因子使细胞发生融合,若只考虑两个细胞发生融合,则有三种情况:两个骨髓瘤细胞融合,两个能产生抗X抗体的B淋巴细胞融合和杂交瘤细胞。两个能产生抗X抗体的B淋巴细胞融
合不能无限增殖。
7.下列关于单克隆抗体的生产和应用,叙述错误的是( )
A.对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞
B.融合并筛选特定的杂交瘤细胞,原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养
C.特定的单克隆抗体可制成试剂,用于检测人体是否受某种抗原的感染D.治疗癌症的“生物导弹”原理之一是单克隆抗体能特异性识别癌细胞
解析:选B 单克隆抗体的制备需对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞;单克隆抗体制备需要细胞融合并筛选特定的杂交瘤细胞,原代培养和传代培养的区分并不是遗传物质的改变与否,传代培养的细胞遗传物质不一定改变;单克隆抗体可以作为诊断试剂,用于检测人体是否受某种抗原的感染;抗体能识别特定的抗原,治疗癌症的“生物导弹”原理之一是单克隆抗体能特异性识别癌细胞,能把药物带到癌细胞所在部位,
杀伤癌细胞,而不损伤健康细胞。
8.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( )
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用氯化钙作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
C.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体
D.该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体
解析:选B B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导,氯化钙不
[能力题组]
9.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )
能作为诱导剂。
A.电激或聚乙二醇均可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可形成杂交瘤细胞
D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂交后代与甲乙两品种有性杂交后代的染色体数目相同
解析:选D 电激或聚乙二醇均可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合;去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理,前者需要用纤维素酶和果胶酶处理,后者需要用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理;小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可形成杂交瘤细胞;某种植物甲乙两品种的体细胞
杂交后代与甲乙两品种杂交后代的染色体数目不同,前者是后者的两倍。10.制备单克隆抗体的过程示意图如下,下列相关说法错误的是( )
A.⑥过程为动物细胞培养过程
B.②可以利用聚乙二醇诱导促进细胞融合C.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的D.③既可以无限增殖,也能产生特定抗体
解析:选D ⑥过程为体外培养杂交瘤细胞过程,为动物细胞培养过程。诱导动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。如果要筛选能产生特定抗体的细胞群,可以通过检测抗原—抗体反应。融合细胞⑤具有双亲的特点,既能无限增殖又能产生单一抗体;③中有多种杂交瘤细胞,不能产生特定
抗体。
11.用a表示骨髓瘤细胞,b表示浆细胞,则细胞融合过程中前两次筛选的目的分别为( )
A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→abB.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab
C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的abD.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa
解析:选C 第一次筛选是选出杂交瘤细胞(即ab),第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab。
12.如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图,下列有关叙述正确的是( )
A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
解析:选D ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞(浆细胞);胰蛋白酶常用在动物细胞培养过程中,其作用是使组织分散成单个细胞,图示②中应使用促融剂如聚乙二醇(PEG);图示③为杂交瘤细胞,其同时具有浆细胞产生抗体的特性和骨髓瘤细胞无限增殖的特性;图示④是经筛选获得的能分泌特异性抗体的杂交
瘤细胞。
13.人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而
及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答下列问题:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________________________。
(2)若要分析杂交瘤细胞中的染色体,可通过__________________等过程制成装片,然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是____________________,在HAT培养基上存活
的细胞可能包括________(填下列序号)。
①无抗体分泌的细胞 ②抗HPV抗体的分泌细胞
③其他无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗体检测呈________性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液________mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培
养的目的。
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是__________________。
(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备
单克隆抗体的思路。________________________________。
解析:(2)利用显微镜观察有丝分裂过程中的染色体,需先制作临时装片;杂交瘤细胞中含有浆细胞和骨髓瘤细胞的染色体,所以比普通淋巴细胞的染色体数目多一倍;在HAT培养基上生存的细胞均为杂交细胞,这些杂交细胞中有分泌HPV抗体的细胞,有分泌其他抗体的细胞,也有不能分泌抗体的细胞。(3)抗体检测呈阳性,说明该杂交瘤细胞可产生所需抗体;为保证每个小孔不多于一个细胞,根据浓度可推断加入细胞稀释液的量:设加入细胞稀释液的最大量是X,则10个/mL×X=1个,X=0.1mL。(4)小鼠形成的抗体与人体抗体不同,故
在人体内可引起免疫反应,所以上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体。(5)根据所给信息可知,还可
通过转基因技术或核移植技术获得既能大量增殖,又能产生特定抗体的杂交细胞。
答案:(1)动物细胞培养、动物细胞融合 (2)解离、漂洗、染色和制片 染色体数目加倍 ①②③ (3)阳
0.1 (4)小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应
(5)通过基因工程向浆细胞中导入prG;利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖的细胞中(答
对其一即可)
14.人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和单克隆抗体制备的流程之一如图所示。请回答下列问题:
(1)过程①代表的是________。
(2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用________和____________________两种工具酶。
(3)过程③采用的实验技术是________,获得的X是______________________。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行________比对;或用图中的_______________
_______________________________进行特异性结合检测。
解析:(1)在中心法则中,对于少数以RNA为遗传物质的病毒,其遗传信息的传递过程需要补充的过程有RNA的逆转录和RNA的复制过程,图中过程①代表的是逆转录。(2)基因工程的步骤是:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定,其中构建基因表达载体中需要限制酶来切割以获取目的基因,同时需要相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏性末端,再通过DNA连接酶连接目的基因和载体。(3)过程③是将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的过程,获得的杂交瘤细胞具备骨髓瘤细胞无限增殖和B淋巴细胞产生抗体的特性,从而能制备单克隆抗体。(4)该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原,故可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗;确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒,可以进行核酸序列的比对,也可以利用单克隆抗体具备的特异性,利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体与患者体内分
离的病毒能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在,进一步进行检测是否为目的RNA病毒。
答案:(1)逆转录 (2)限制酶 DNA连接酶 (3)细胞融合 杂交瘤细胞 (4)A蛋白 核酸(基因)序列
抗A蛋白的单克隆抗体
15.如图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程,请据图回答有关问题:
(1)图中将H7N9病毒的抗原基因导入受体细胞常用的方法是____________。
(2)在受体细胞的培养过程中,为了防止污染,通常还要在细胞培养液中添加一定量的_________________
___,其培养液与植物组织培养的培养基相比,特有的天然成分是________________。