江西****药业股份有限公司GMP文件
原料检验操作规程
题目： 玄参检验操作规程 编号：TS-GC-YL-10480-02 制定人： 制定日期：2024年 月 日 版本：2 页数：1/3 审核人： 审核日期：2024年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期：2024年 月 日 生效日期：2024 年 月 日 目的：规范玄参原药材检验操作 范围：玄参原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 2 2.1 2.2 标准依据：《中国药典》2024年版一部及四部 【性状】 仪器：直尺。 方法：本品呈类圆柱形，中间略粗或上粗下细，有的微弯曲，长6～20cm，直径1～3cm。表面灰黄色或灰褐色，有不规则的纵沟、横长皮孔样突起和稀疏的横裂纹和须根痕。质坚实，不易折断，断面黑色，微有光泽。气特异似焦糖，味甘、微苦。 【鉴别】 （1）显微鉴别 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛等。 方法：取本品，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：本品横切面：皮层较宽，石细胞单个散在或2～5个成群，多角形、类圆形或类方形，壁较厚，层纹明显。韧皮射线多裂隙。形成层成环。木质部射线宽广，亦多裂隙；导管少数，类多角形，直径约至113μm，伴有木纤维。薄壁细胞含核状物。 （2）薄层鉴别 仪器与试剂：分析天平、硅胶G薄层板、层析缸、明党参对照药材、正丁醇、冰醋酸等。 方法：取本品粉末2g，加甲醇25ml，浸泡1小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取玄参对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取哈巴俄苷对照品， 加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则 0502）试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以 三氯甲烷-甲醇-水（12：4：1）的下层溶液为展开剂，置用展开剂预饱和 15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹 至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 4 水分 不得过16.0%（通则0832第二法）。 4.1 仪器：电热鼓风干燥箱、分析天平、粉碎机、药筛等。 4.1.1 4.1.2 方法：取供试品2～5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，开启瓶盖在100～105℃干 3 3.1 3.1.1 3.1.2 3.2 3.2.1 3.2.2
第 1 页 共 4 页
江西****药业股份有限公司GMP文件
4.1.3 4.2 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.3 4.3.1 4.3.2 4.3.3 燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（％）。 计算公式： W样+W0－W1 样品含水量% = ×100% W样 式中： W0 称量瓶的重量（g）。 W1称量瓶与样品的重量（g）。 W样样品的重量（g）。 总灰分 不得过5.0％（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则2331)测定，不得过150mg/kg 仪器与试剂：电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L)等 测定法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： 二氧化硫残留量（mg/kg）=（V供-V空）×C×0.032×106 W供 式中 V供 为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； ---------------------------- --------------------------- --------------------------- 第 2 页 共 4 页
江西****药业股份有限公司GMP文件
5 5.1 5.1.1 5.1.2 V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； c 为氢氧化钠滴定液摩尔浓度，mol/L； W供 为供试品的重量，g。 0.032为lm l氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g； 酸不溶性灰分 不得过2.0%（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取上述灰分，加入稀盐酸10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止，滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。 计算公式： W1－W0 酸不溶性灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1-----------酸不溶性灰分与坩埚的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 【浸出物】 照水溶性浸出物测定法（通则2201）项下的冷浸法测定，不得6 少于60.0%。 仪器与试剂：电热鼓风干燥箱、分析天平、蒸发皿、数显恒温水浴锅等。 6.1 6.1.1 方法：取供试品约4g，精密称定，置250～300ml的锥形瓶中，精密加水100ml，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器 迅速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上 蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重 量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（％）。 6.1.2 计算公式： W1－ W0 100 水溶性浸出物% = × × 100% 式中： 20 W样×（1－水分） W0 ------- 蒸发皿的重量（g）。 W1 -------- 水溶性浸出物与蒸发皿的重量（g）。 W样------- 样品的重量（g）。 【含量测定】 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 7 仪器与试剂：高效液相色谱仪、数显恒温水浴锅等。 7.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以7.2 乙腈为流动相A，以0.03%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度 洗脱；检测波长为210nm。理论板数按哈巴俄苷与哈巴苷峰计算均应不低于 5000。 时间（分钟） 流动相A （%） 流动相B（%） 第 3 页 共 4 页
江西****药业股份有限公司GMP文件
7.2.1 7.2.2 7.2.3 7.2.4 0～10 3→10 97→90 10～20 10→33 90→67 20～25 33→50 67→50 25～30 50→80 50→20 30～35 80 20 35～37 80→3 20→97 对照品溶液的制备 取哈巴苷对照品、哈巴俄苷对照品适量，精密称定，加30%甲醇制成每1ml含哈巴苷60μg、哈巴俄苷20μg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理（功率500W，频率40kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含哈巴苷（C15H24O10）和哈巴俄苷（C24H30O11）的总量不得少于0.45%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 m ------------------------- 样品的重量（g）。 f ------------------------- 稀释体积。 第 4 页 共 4 页
GC-YL-10480玄参检验操作规程
