新生大鼠皮层神经元原代培养及糖-氧剥夺损伤模型的建立
杨传豪;王业忠;赵冬;刘祺;姬云翔;李令建;许晖;戴晶;何学君;蔡云鹏
【期刊名称】《医学信息》 【年(卷),期】2014(000)016
【摘要】目的:建立较为简便的新生大鼠皮层神经元细胞原代培养方法并建立糖-氧剥夺细胞损伤模型。方法取新生的大鼠(24 h)大脑皮层组织,消化后种植在多聚-L-赖氨酸包被的六孔培养皿上,用含10%胎牛血清DEME-HG液种植,4~8 h后换再用含有B27的Neurobasal培养基维持饲养。于不同时间点在倒置相差显微镜下观察形态变化,用免疫组化方法对神经元特异性标记物NSE染色鉴定。选取培养第7 d的神经元随机分为不作处理的对照组和过糖-氧剥夺建立细胞损伤模型组,Western blotting检测NSE蛋白表达。结果2~8 h神经元细胞贴壁,随着时间的延长,形态呈多变,突起逐渐增多,神经元突起间相互接触形成网络,培养7~10 d时神经元胞体最为丰满,通过免疫组化验证证明所分离培养的是神经元细胞。糖-氧剥夺细胞损伤模型组NSE蛋白表达量较对照组 NSE蛋白表达量明显降低。结论该神经元方法简单易行,神经元纯度较高,并成功的建立糖-氧剥夺神经元损伤模型。 【总页数】2页(54-54,55)
【关键词】神经元;原代培养;neurobasal培养基;B27;糖-氧剥夺;细胞模型 【作者】杨传豪;王业忠;赵冬;刘祺;姬云翔;李令建;许晖;戴晶;何学君;蔡云鹏 【作者单位】石河子大学医学院第一附属医院神经外科,新疆 石子河 832000; 石河子大学医学院,新疆 石子河 832000;石河子大学医学院第一附属医院神经外科,新疆 石子河 832000; 石河子大学医学院,新疆 石子河 832000;石河子