第七章 体液检验
通过本章学习,你将能回答关于“体液检验”的下列问题:1.脑脊液标本采集和处理的要求? 2.病理时脑脊液的颜色变化及临床意义? 3.脑脊液蛋白质检查有哪些方法和各自特点? 4.简述脑脊液主要酶学检查和临床意义? 5.脑脊液细胞计数有哪些方法? 6.脑脊液常规检查项目有哪些临床应用? 7.常见中枢神经系统疾病脑脊液有哪些改变? 8.漏出液和渗出液产生的机制和原因? 9.真性与假性乳糜性积液的鉴别? 10.浆膜腔积液有哪些酶学检查? 11.如何鉴别漏出液和渗出液? 12.有哪些检验项目可鉴别结核性和恶性胸腔积液? 13.关节腔积液有哪些化学检查? 14.关节腔积液有哪些特殊细胞? 15.简述常见关节炎关节腔积液检查的特征? 16.精液一般检查项目有哪些? 17.精液显微镜检查有哪些主要内容和方法? 18.简述异常精子形态的种类和临床意义? 19,简述计算机辅助精液分析的原理? 20.试述前列腺液显微镜检查的主要项目和临床意义? 21.简述阴道清洁度分级的根据? 22.检查阴道毛滴虫有哪些方法? 23.阴道加德纳菌和线索细胞有何关系和临床意义? 24.简述胃酸测定项目和临床意义? 25.简述十二指肠引流液理学检查特点和临床意义? 26.试述羊水胎儿成熟度检查的项目和临床意义?
第一节 脑脊液检查
脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)是来源于脑室和蛛网膜下腔中的无色透明液体,正常成人脑脊液总量约为120~180ml,约占身体内体液总量的1.5%。
正常脑脊液含有一定的细胞和化学成分,许多成分与血浆成分相等或稍低。病理情况下,被血脑屏障隔离在外的物质可进入脑脊液,相应物质浓度增高。检查脑脊液中各项指标可了解这些变化,对临床疾病的诊治有重要意义。中枢神经系统疾病脑脊液检查的灵敏度和特异性见表7-1。
表7-1 临床疾病实验室脑脊液检查项目灵敏度和特异性
灵敏度/特异性 高/高 高/中 中/高 中/中 中枢神经系统疾病 细菌性脑膜炎、结核性脑膜炎、真菌性脑膜炎 病毒性脑膜炎、蛛网膜下腔出血、多发性硬化症、神经梅毒、椎旁脓肿 脑膜恶性肿瘤 颅内出血、病毒性脑炎、硬膜下血肿
一、标本采集和处理
1.标本采集 脑脊液由临床医师进行腰椎穿刺,必要时从小脑延脑池或侧脑室穿刺采集。脑脊液分别收集于3个无菌容器中,采集量见表7-2。第1管做细菌学检查,第2管做化学或免疫学检查,第3管做常规检查。标本采集后应在检验申请单上注明标本的采集日期和时间。
表7-2 脑脊液检查标本采集量
检测项目 微生物及病毒学 细胞学及临床化学 成人(ml) 儿童(ml) 2 2~8 1 1~1.5 备注 如可能,应在治疗前或治疗结束后36h采集 除细胞学检查外,上清液则用于临床化学或免疫指标检测 2.标本转运 脑脊液标本必须由专人或专用的物流系统转运。为保证安全及防止标本溢出,转运过程中应采用封闭的容器。如标本溢出,则立即采用0.2%过氧乙酸溶液或75%乙醇溶液消毒被污染的环境。
3.标本保存和接收 ①脑脊液标本采集后应立即送检。不能及时检查的标本需保存于2℃~4℃环境中,常规检查不应超过4h。脑脊液置久,则细胞破坏或变形,并可产生纤维蛋白凝集,导致细胞分布不匀,使检查不准确;葡萄糖酵解可造成糖含量减低。②合格脑脊液标本基本要求:检验申请单填写清楚、注明初步诊断、容器标识清晰、采集量大于1m。
二、一般检查
(一)理学检查 1.透明度
【参考值】 清澈透明。
【临床意义】脑脊液白细胞总数超过0.3×10/L时,常会出现微浑或浑浊。蛋白质含量增高或含有大量细菌、霉菌等,也会使其浑浊。结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微浑,化脓性脑膜炎常呈明显灰白样浑浊。正常脑脊液可因穿刺过程中带入红细胞而呈轻度浑浊。
2.颜色
【参考值】无色透明或淡黄色。
【临床意义】中枢神经系统发生感染、出血、肿瘤等,脑脊液中出现过多的白细胞或红细胞和其他色素,颜色发生异常改变。常见脑脊液颜色变化及临床意义见表7-3。脑脊液新鲜与陈旧性出血的鉴别见表7-4。 表7-3 脑脊液的颜色变化及临床意义 颜色 无色 红色 原因 临床意义 正常脑脊液、病毒性脑炎、轻型结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、神经梅毒 穿刺损伤出血(最初几滴为红色,以后渐清)、蛛网膜下腔出血或脑室出血 黄色 黄变症 陈旧性出血、黄疸、淤滞和梗阻,黄色素、胡罗卜素、黑色素、脂色素增高 乳白色 淡绿色 褐黑色 白细胞增高 脓性分泌物增多 色素增多 脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎 铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、甲型链球菌所引起的脑膜炎 脑膜黑色素瘤、高胆红素血症 表7-4 脑脊液新鲜出血与陈旧性出血鉴别
项目 外观 易凝性 离心后上清液 红细胞形态 上清液隐血试验 新鲜性出血 浑浊 易凝 无色透明 无变化 多为阴性 陈旧性出血 清亮、透明 不易凝 红色、黄褐色或柠檬色 皱缩 阳性 9
出血 白细胞计数 3.凝固性
不增高 继发性或反应性增高 【参考值】无凝块和无沉淀(放置24h不形成薄膜)。
【临床意义】当脑脊液内蛋白质(包括纤维蛋白原)增加至10g/L时,可出现薄膜或凝块。化脓性脑膜炎一般在1~2h内形成薄膜、凝块或沉淀。结核性脑膜炎在12~24h形成膜状物。神经梅毒可出现小絮状凝块。蛛网膜下腔阻塞时可呈黄色胶冻状。
4.比重 常用折射仪检测比重。 【参考值】1.006~1.008。
【临床意义】比重增高常见于各种颅内炎症;比重减低见于脑脊液分泌增多。 (二)化学检查
正常脑脊液蛋白质含量较血浆低,约为血浆的1%,主要为清蛋白。在中枢神经系统发生病变时,脑脊液蛋白质含量可有不同程度增高。检测脑脊液蛋白质含量可分为定性和定量试验2类。
1.蛋白质定性检查 常用方法有潘迪试验(Pandy test)、硫酸铵试验和李文生试验(Lee-Vinson test)。 【检测原理】①Pandy试验:脑脊液蛋白质主要是球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。②硫酸铵试验:饱和硫酸铵能沉淀球蛋白,出现白色沉淀。③Lee-Vinson试验:磺基水杨酸和氯化高汞均能沉淀脑脊液蛋白质,根据沉淀物比例不同,可鉴别化脓性与结核性脑膜炎。
【方法学评价】脑脊液蛋白质定性检查方法学评价见表7-5。
表7-5 脑脊液蛋白质检查的方法学评价
方法 Pandy试验 Ross-Jone试验 Nonne-Apelt试验 Lee-Vinson试验 优点 操作简便、标本量少、易于观察,灵敏度高 检测球蛋白,特异性高 检测球蛋白和清蛋白,特异性高 检测球蛋白和清蛋白 假阳性率高 灵敏度低 操作繁琐 操作繁琐、特异性低 缺点 【质量保证】脑脊液穿刺过程中,如有血液混入,可出现假阳性。试验中所用试管、滴管要避免污染,防止出现假阳性。Pandy试验中所用的苯酚试剂饱和度减低会出现假阴性结果,应定期更换。 【参考值】阴性。
【临床意义】阳性常见于脑组织和脑膜炎症性病变,如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。强阳性反应见于脑出血、脑外伤(血液混入脑脊液中)。
2.蛋白质定量测定 脑脊液蛋白定量主要方法有磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、双缩脲法和染料结合法。
临床多采用磺基水杨酸-硫酸钠比浊法。
【检测原理】磺基水杨酸为生物碱试剂,能沉淀蛋白质(对清蛋白的沉淀能力比球蛋白强),再与标准蛋白浊度对比进行定量测定。
【方法学评价】脑脊液蛋白质定量检查方法学评价见表7-6。
表7-6 脑脊液蛋白质定量检查方法学评价
方法 比浊法 (磺基水杨酸-硫酸钠) 染料结合比色法 (邻苯三酚红) 免疫学方法 双缩脲法 重复性好 标本用量少、特异性高 操作便捷、受蛋白质种类影响较小 对试剂要求高 灵敏度较差,特异性低 优点 操作便捷,无需要特殊仪器 缺点 标本用量大、重复性差、影响因素较多。蛋白浓度过高时,要稀释后进行测定 操作快速、灵敏度高、标本用量少、要求高、线性范围窄 【质量保证】脑脊液如有大量细胞或浑浊,应先离心。如蛋白质浓度过高,应先用生理盐水稀释后重新测定。
【参考值】0.2~0.4g/L(腰椎穿刺);0.1~0.25 g/L(小脑延髓池穿刺);0.05~0.15g/L(侧脑室穿刺)。
【临床意义】蛋白质含量增高常见于:①中枢神经系统炎症:脑部感染时脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加,先清蛋白增高,随后球蛋白和纤维蛋白增高。②神经根病变:如梗阻性脑积水、Guillain-Barre综合征,多数患者有蛋白质增高,而细胞数正常或接近正常,即蛋白-细胞分离现象。③椎管内梗阻:脑与蛛网膜下腔互不相通,血浆蛋白由脊髓静脉渗出,脑脊液蛋白质含量显著增高,有时高达30~50g/L。如脊髓肿瘤、转移癌、粘连性蛛网膜炎等。④其他:早产儿脑脊液蛋白质含量可达2g/L,新生儿为0.8~1.0g/L,出生2个月后逐渐降至正常水平。
3.葡萄糖测定 测定方法与血浆葡萄糖测定法相同,含量仅为血糖的3/5。 【检测原理】常用方法为葡萄糖氧化酶法或已糖激酶法。
【方法学评价】氧化酶法中一些还原性物质可产生竞争性抑制,造成测定结果偏低,使反应的特异性减低。己糖激酶法基本不受溶血、脂血、黄疸、尿酸、维生素C及药物的干扰,特异性和准确性均高于葡萄糖氧化酶法。
【质量保证】脑脊液常含细胞和细菌,其葡萄糖含量测定应在留取标本后及时进行,如果不能及时(4h内)处理,应加适量防腐剂抑制细菌或细胞酵解葡萄糖,防止假性减低。
【参考值】①腰椎穿刺:2.5~4.4mmol/L。②小脑延髓池穿刺:2.8~4.2mmol/L。③脑室穿刺:3.0~4.4mmol/L。
【临床意义】正常脑脊液内葡萄糖含量仅为血糖的50%~80%,早产儿及新生儿因血脑屏障通透性增高,