GB 5006—85
本标准适用于水稻、小麦、玉米、谷子、高粱等谷物籽粒中粗淀粉含量的测定。 1 测定原理
淀粉是多糖聚合物,在一定酸性条件下,以氯化钙溶液为分散介质,淀粉可均匀分散在溶液中,并能形成稳定的具有旋光性的物质。而旋光度的大小与淀粉含量成正比,所以可用旋光法测定。 2 仪器和设备
2.1 分析天平:感量0.001 g。 2.2 实验用粉碎机。
2.3 电热恒温甘油浴锅:119±1℃,浴锅内放入工业甘油,液层厚度为2 cm左右。
2.4 旋光仪:钠灯,灵敏度0.01度。 2.5 锥形瓶:150 ml,250 ml。 2.6 容量瓶:100 ml。
2.7 滤纸直径:15~18 cm,中速。 3 试剂配制
3.1 氯化钙-乙酸溶液:将氯化钙(CaCl2·2H2O,分析纯)500 g溶解于600 ml蒸馏水中,冷却后,过滤。其澄清液以波美比重计测定,在20℃条件下调溶液比重为1.3±0.02;用精密pH试纸检查,滴加冰乙酸(见GB 676—78《冰乙酸》,分析纯),粗调氯化钙溶液pH值为2.3左右,然后再用酸度计准确调pH值为2.3±0.05。
3.2 30%硫酸锌溶液(W/V):取硫酸锌(ZnSO4·7H2O,见GB 666—78《硫酸锌》,分析纯)30 g,用蒸馏水溶解并稀释至100 ml。
3.3 15%亚铁氰化钾溶液(W/V):取亚铁氰化钾(K4Fe(CN)GB 1273—776·3H2O 《亚铁氰化钾》,分析纯)15 g,用蒸馏水溶解并稀释至100 ml。 4 样品的选取和制备
4.1 将样品挑选干净(带壳种子需脱壳),按四分法缩减取样约20 g。
4.2 将选取的样品充分风干或在60~65℃的条件下约烘6 h后粉碎,使95%的样品通过60目筛,混匀,装入磨口瓶备用。 5 测定步骤
5.1 称样:称取样品2.5 g,准确至0.001 g。按GB 3523—83《种子水分测定法》测定水分含量。
5.2 水解:将称好的样品放入250 ml锥形瓶中,在水解前5 min左右,先加10 ml氯化钙-乙酸溶液湿润样品,充分摇匀,不留结块,必要时可加几粒玻璃珠,使其加速分散,并沿瓶壁加50 ml氯化钙-乙酸溶液,轻轻摇匀,避免颗粒粘附在液面以上的瓶壁上。加盖小漏斗,置于119±1℃甘油浴中,要求在5 min内达到所需温度,此时瓶中溶液开始微沸,继续加热25 min。取出放入冷水槽,冷却至室温。
注:通过实测得知氯化钙-乙酸溶液的沸点为118~120℃,当甘油浴的温度回升至119±1℃时,样品瓶中溶液开始微沸,因此也可根据瓶中液体沸腾程度,校准控温仪的温度。
5.3 提取:将水解液全部转入100 ml容量瓶中,用30 ml蒸馏水多次冲洗锥形瓶,洗液并入容量瓶中。加1 ml硫酸锌溶液,摇匀,再加1 ml亚铁氰化钾溶液,充分摇匀以沉淀蛋白质。若有泡沫,可加几滴无水乙醇消除。用蒸馏水定容,摇匀,过滤,弃去10~15 ml初滤液,滤液供5.4测定。
5.4 测定:测定前,用空白液(氯化钙-乙酸液∶蒸馏水=6∶4)调整旋光仪零点,再将滤液装满旋光管,在20±1℃下进行旋光测定,取两次读数平均值。 6 结果计算 6.1 计算公式
粗淀粉(干基)的含量按下式计算。
式中:
在旋光仪上读出的旋转角度;
α──
L── 旋光管长度,dm; W── 样品重,g; 203── 淀粉比旋度;
H── 样品水分含量,%。
6.2 结果表示
平行测定的数据用算术平均值表示,保留小数后两位。 6.3 允许相对误差
谷物籽粒粗淀粉含量的两个平行测定结果的相对误差不得大于1.0%。
附 录 A 样品的脱脂与脱糖
(参考件)
A.1 谷物种子内含可溶性糖和脂肪较少,经过多次洗糖与不洗糖、脱脂与不脱脂对比试验证明,其中有的谷物籽粒(小麦、水稻、高粱等)粗淀粉测定结果极相近,均在允许误差范围之内,故本标准不要求脱脂与脱糖处理。如遇有特殊样品(脂肪含量超过5%,可溶性糖含量超过4%)需要脱脂或脱糖时,可将称好的样品放入50 ml离心管中,用乙醚脱脂,然后用60%热乙醇(以重量计)搅拌,离心,倾去上清液,重复洗至无糖反应为止。最后用60 ml氯化钙-乙酸溶液将离心管内残留物全部转入250 ml锥形瓶进行粗淀粉测定。
附加说明:
本标准由中华人民共和国农牧渔业部提出。 本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室起草。 本标准主要起草人赵铁男、孟广勤。