生化分离工程复习题
一、填空题
1. 生化分离过程主要包括四个方面： 预处理 、 细胞分离 、 纯化 、产品加工。 2. 发酵液常用的固液分离方法有 沉淀法 和 结晶法 等。 3. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜 、超滤膜、纳滤膜和 反渗透膜 ；
4. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法 简单洗脱 和 梯度洗脱 。
5. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 各种蛋白质等电点
的不同。
6. 典型的工业过滤设备有 板框压滤机 和 转筒真空过滤机 。
7. 常用的蛋白质沉析方法有 盐析法 、 等电点沉淀 和有机溶剂沉淀。 8. 离子交换树脂由 载体 、 活性基团 和可交换离子组成。9. 超临界流体的特点是与气体有相似的 扩散性能 ，与液体有相似的 密度 。 二、单选题
1．供生产生物药物的生物资源不包括（ D ） A. 动物 B. 植物 C. 微生物 D. 矿物质 2．下列哪个不属于初步纯化：( C )
A. 沉淀法 B. 吸附法 C. 亲和层析 D. 萃取法 3．HPLC是哪种色谱的简称（ C ）。
A. 离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 4．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（ B ） A. 离心分离 B. 过滤 C. 沉降 D. 超滤 5．适合小量细胞破碎的方法是（ C ）
A. 高压匀浆法 B. 超声破碎法 C. 高速珠磨法 D. 高压挤压法 6．有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（ D ） A. 乙酸乙酯 B. 正丁醇 C. 苯 D. 丙酮
7．液-液萃取时常发生乳化作用，如何避免（ D ） A. 剧烈搅拌 B. 低温 C. 静止 D. 加热
8．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（ B ）
A．分辨率高 B．变性作用小 C．杂质易除 D．沉淀易分离 9．工业上常用的过滤介质不包括（ D ）
A. 织物介质 B. 堆积介质 C. 多孔固体介质 D. 真空介质 10．哪一种膜孔径最小（ C ）
A. 微滤 B. 超滤 C. 反渗透 D. 纳米过滤
11．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ） A. 离子交换色谱 B. 亲和色谱 C. 凝胶过滤色谱 D. 反相色谱 12．“类似物容易吸附类似物”的原则，一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（A．极性溶剂 B．非极性溶剂 C．水 D．溶剂
13．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法( A ) A. 化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D. 高速珠磨 14．离子交换树脂适用（ A ）进行溶胀 A. 水 B. 乙醇 C. 氢氧化钠 D. 盐酸 15．使蛋白质盐析可加入试剂（ D ）
） B A. 氯化钠 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸铵 16．超临界流体萃取法适用于提取（ B ）
A. 极性大的成分 B. 极性小的成分 C. 离子型化合物 D. 能气化的成分 17．最常用的干燥方法有（ D ）
A. 常压干燥 B. 减压干燥 C. 喷雾干燥 D. 以上都是 18．分子筛层析指的是（ C ）
A. 吸附层析 B. 分配层析 C. 凝胶过滤 D. 亲和层析 19．为加快过滤效果通常使用（ C ）
A. 电解质 B. 高分子聚合物 C. 惰性助滤剂 D. 活性助滤剂 20．影响电泳分离的主要因素（ B ）
A. 光照 B. 待分离生物大分子的性质 C. 湿度 D. 电泳时间 21．发酵液的预处理方法不包括（ C ）
A. 加热 B. 絮凝 C. 离心 D. 调pH
22．哪种细胞破碎方法适用工业生产（ A ）
A. 高压匀浆 B. 超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法 23．液-液萃取时常发生乳化作用，如何避免（ D ） A. 剧烈搅拌 B. 低温 C. 静止 D. 加热
24．在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中，目标蛋白质存在于（ A ） A. 上相 B. 下相 C. 葡聚糖相 D. 以上都有可能 25．使蛋白质盐析可加入试剂（ D ）
A. 氯化钠 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸铵 26．超滤技术常被用作（ C ）
A. 小分子物质的脱盐和浓缩 B. 小分子物质的分级分离 C. 小分子物质的纯化 D. 固液分离 27．吸附色谱分离的依据是（ A ）。
A. 固定相对各物质的吸附力不同 B. 各物质分子大小不同
C. 各物质在流动相和固定相的分配系数不同 D. 各物质与专一分子的亲和力不同 28．人血清清蛋白的等电点为，在pH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A. 正极移动 B. 负极移动 C. 不移动 D. 不确定。 29．蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。
A．离子交换层析 B. 亲和层析 C. 凝胶层析 D. 聚酰胺层析 30．阴离子交换剂（ C ）。
A. 可交换的为阴、阳离子 B. 可交换的为蛋白质 C. 可交换的为阴离子 D. 可交换的为阳离子
31．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ）。 A. 亲和层析 B. 凝胶层析 C. 离子交换层析 D. 盐析 32．下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（ D ）。
A. 凯氏定氮法 B. 考马斯亮蓝法 C. 福林-酚法 D. 核磁共振 33．物理萃取即溶质根据（ B ）的原理进行分离的。 A. 吸附 B. 相似相溶 C. 分子筛 D. 亲和 34．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀（ B ） A. 甲醇 B. 乙醇 C. 缓冲液 D. 乙酸乙酯
35．疏水性相互作用层析通常在（ D ）的条件下进行
） A A. 酸性 B. 碱性 C. 中性 D. 高浓度盐溶液
36．超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度达到分离的目的（ C ） A. 降温 B. 升高压力 C.升温 D. 加入夹带剂 37．HPLC是哪种色谱的简称（ C ）。
A．离子交换色谱 B. 气相色谱 C. 高效液相色谱 D. 凝胶色谱 38．最常用的干燥方法有（ D ）
A. 常压干燥 B. 减压干燥 C. 喷雾干燥 D. 以上都是 三、判断题
1．细胞破碎技术是生化分离操作中必需的步骤。（ × ） 2．板框压滤机可过滤所有菌体。（ × ） 3．冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。（ √ ）
4．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。（ √ ）
5．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取。（ × ） 6．助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。（ × ）
7．通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。（ √ ） 8．珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。（ × ） 9．冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。（ √ ）
10．氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。（ √ ） 11．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带正电。（ × ） 12．层析分离是一种化学的分离方法。（ × ） 13．层析点样时用一根毛细管，吸取样品溶液，在距薄层一端的起始线上点样，样品点直径小于3mm。（ √ ）
14．凝胶层析会使得大分子物质后流出，小分子物质先流出。（ × ）
15．蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。（ × ）
16．溶剂萃取中的乳化现象一定存在。（ × ）
17．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取。（ × ） 18．应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行。（ × ） 19．氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。（ √ ） 20．色谱分离技术中固定相都是固体。（ × ）
四、简答题
1. 生化分离技术的基本涵义及内容
生化分离是从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品（如具有药理活性作用的生物药物等）的过程，又称下游工程。
发酵液→预处理→细胞分离→（细胞破碎→细胞碎片分离）→初步纯化→高度纯化→成品加工
2. 简述生化分离过程的特点
特点：1、目的产物在初始物料（发酵液）中的含量低；2、培养液是多组分的混合物，除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代谢物（几百上千种）、培养基成分、无机盐等；3、生化产物的稳定性低，易变质、易失活、易变性，对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等非常敏感；4、对最终产品的质量要求高
生化分离工程复习题2及答案
