高效液相色谱仪操作规程
原理：高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。 仪器：
名称LC-20AD高效液相色谱仪，分硬件与软件两个部分，硬件：DGU-20A、LC-20AD、SIL-20A、SPD-20A、CTO-20AC五个模块，软件labsolutions工作站。
硬件
脱气机、泵、自动进样器、托盘、柱温箱 每天来
1、开机（按钮左下角） 2、流动相放好。 流动相
水相：一般纯化水、超纯水、哇哈哈、条件好屈臣氏，水相每天现配最好。 有机相：色谱级试剂
上机之前流动相先过滤（0.45μm以下滤膜），然后超声10-20min。
托盘上五根管道，ABCD用于放流动相，一般情况四根用两根A-B、A-C，岛津仪器最好A与其他搭配，便于设参数，具体流动相中药依据药典。另一个无标识为自动进样器清洗液，一般是50%甲醇水（反相系统），正相系统则与流动相同，正反相转化①先用流动相过②用异丙醇过滤③用甲醇水。
补充：正相色谱法 采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙
醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。
反相色谱法：一般用非极性固定相（如C18、C8)；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。 3、拧松黑色排气阀。
拧松黑色排气阀，之后点击两次purge，分别为泵单元上按钮与自动进样器上purge按钮，注：泵单元上按钮点击时，流动相管道用的哪些，purge那些，可于工作站上面设置。比如用的A与B，先purge A，之后purge B。purge之后一定要拧紧黑色排气阀，非purge下，拧紧，否则不出峰。
关于泵单元，一般泵的压力范围0.2MPa,压力故障大部分是由于单向阀造成的，清洗单向阀（90%水+10%的甲醇超声10-20min，纯的异丙醇10-20min，再用90%水+10%的甲醇超声10-20min，实在不行可用5%的稀硝酸替代异丙醇那一步。）泵最大流速10ml/min ,40MPa。
单向阀上下左右共计四个，下面进，上面出，之间是泵头，再上面是压力传感器，下面有个在线过滤器，黑色即为排气阀，这一次purge，流速8ml/min,3min stop。 什么时候purge？
（1）滤头离开液面（否则可能有气泡进来） （2）每天分析之前（温差变化，可能有气泡） 4、接柱子、上样品
流动相-脱气机-低压阀-入口单向阀-泵头-出口单向阀-压力传感器-拧松-purge-拧紧-混合器-自动进样器
首先流动相到混合器，混合，混合器在柱温箱左边，柱温箱可降温，温度控制范围最低温度为环境温度减10℃，报警系统其他单元在右下角感应，柱温箱则是浓度报警，可打开，擦拭一下。
混合器混合后，到自动进样器。自动进样器有两个托盘，分别为0号架，1号架，
一般用1号架，共105孔，孔放1.5ml瓶子，一般液体放一半即可，瓶盖可清洗，垫片是一次性，垫子一面深色与里面，特殊材料，耐酸耐腐蚀。架子往里面推有声音，才是推进去，正常情况下，自动进样器工作状态门要关着（否则仪器显示door is open）。
接柱子：每根柱子有方向，箭头，即流动相流动方向。每天做完冲柱子（10%甲醇水 1ml/min 0.5h+纯甲醇1ml/min 0.5h为最低要求），主子是耗材，轻拿轻放，长期不用，冲一遍拿下，两头堵住，放于柱箱中。
样品通过柱子到流动池，氘灯提供能量，到紫外检测器分离，分离后与工作站显示图谱，废液进废液瓶。
氘灯最大使用时间2000h,检测器最大波长700nm。
软件（labsolutions工作站）
Labsolution-用户名、密码-进入工作站 工作站左边仪器、处理工具、管理工具、手册 点击仪器-选择项目-岛津-连接仪器-主界面
主界面左边是工具栏，中间图谱显示区，右边详细参数。软件一般分三大模块，分别为参数设定、图像采集、后处理。
1、参数设定
岛津LC-20AD液相使用说明
