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别构抑制剂（负效应剂 前面讲的即是），可以是底物、产物（或其它物质）。 别构酶一般是寡聚酶，由两个以上亚基组成，有调节亚基，调节亚基结合效应剂决定反应速度，催化亚基决定反应性质（结合底物与催化）。 别构酶的反应速度与[S]不服从米氏方程，v-[S]曲线，不是直角双曲线，而是呈S形曲线，有的则为较平坦的曲线，有利于反应速度的调节。
-如：ATCase合成CTP的第一个酶 COO
+ 氨甲酰P + Asp H2N—C—NH—CH + Pi + H同种协同效应 抑 O CH2 1 Rs=81 -
制 COO 2 Rs＜81 3 Rs＞81
2：正协同效应
CTP UTP UMP ATP是ATCase(天冬氨酸转氨甲酰酶)的别构激活剂，有三个调节亚基，两个催化亚基，而CTP是其抑制剂，使合成量与需要量平衡，能自我调节。
Asp与酶的结合具正协同效应，CTP对Asp与酶的结合具负协同效应。使ATCase具有在高[Asp]时才能起作用（反应速度下降）。
ATP对Asp与ATCase的结合具有正协同作用（异醋效应），反应加快，促进CTP的合成，多方的调节使需要与合成保持平衡。
4
3 v 1
2 异种协同效应
S0.5(Km) [Asp] 1：没有CTP和ATP ；2：加入CTP；3：加入ATP ；4：加ATP使酶饱和。 这种作用可用Rs(称为协同指数也称饱和比值)表示。
Rs=S0.9/S0.1米氏酶为81，具有正协同作用的Rs＜81，具有负协同作用的Rs＞81。 S0.9和S0.1表示反应速度为最大反应速度90％和10％时的底物浓度 因为0.9V= V [S] /（Km+[S]）0.9 Km+0.9[S]=[S]，[S]=9Km 0.1 V= V [S] /（Km+[S]）0.1 Km+0.1[S]=[S] [S]=1/9Km 所以Rs=81(米氏酶)
协同作用：一个配体与酶结合后对另一配体与酶结合的影响。
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第八节 酶活力的测定p335
酶促进反应的能力，以酶所催化的反应速度表示。如，POD的作用：
如： H2O2 + H2N— — —NH2 蓝色物质（吸收峰580nm）。
1U(unit)=1μmol/min 即1分钟使1μmol底物转化为产物所需的酶量(最适条件下25℃)。
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1Kat：1秒内转化1mol底物所需的酶量。1Kat = 6 × 10U(60*10) 测定条件：pH、温度等最适，底物浓度足够高，初速度，固定条件。 比活力：单位质量样品所含U数，也可表示酶的纯度。 鲜样、蛋白
第九节 酶的制备
从生物组织中提取：产生器官。如，木瓜蛋白酶（果实）， 微生物发酵生产。选择高产量的菌株
分离蛋白、核酸的方法：沉淀、离心、层析、电泳等要避免变性。 胞内酶：破碎细胞、组织。
胞外酶：直接从体液中分离纯化。 分离纯化酶的方法：
1. 盐析法 破坏水合膜，中和电荷
2. 有机溶剂沉淀法。较好的方法，但要低温（乙醇、丙酮等极性有机溶剂）。 3. 吸附法：酶液中加入吸附剂（Al2O3、硅藻土、Ca3（PO4）2、淀粉、羟基磷灰石等）吸附纯化，再过滤、改变条件洗脱从吸附剂上分离，现多制成层析柱（吸附层析） 凝胶过滤和超离心(根据分子大小不同)、离子交换层析(带电性不同)、亲和层析(与底物配体结合)。 纯酶易失活，干粉（冷冻、减压干燥制成）低温下保存。 提取中的常用术语：
总活力 = 活力单位数/ml酶液*总体积（ml）
比活力 = 活力单位数/mg蛋白 =总活力/总蛋白（氮）mg 表示纯度 回收率（产率） = 每步骤所得总活力/第一步的总活力 纯化倍数 =每步的比活力/前一次的比活力？
第十节 酶的应用（自学）
因为其催化效率高，专一性强无负反应，产物便于提纯，条件温和，所需设备简单，无需大量的化工原料（创造高温、高压、强酸、强碱条件及其适应性的设备）。所以应用范围广。主要用于以下几方面： 淀粉酶用于纺织品的脱浆，（节约碱），避免污染 蛋白酶用于脱毛、皮革软化、蚕丝脱胶，加入洗衣粉等洗涤剂中洗涤蛋白污物。 脂肪酶：食品增香、羊毛洗涤(脱脂)。 固定化酶：酶连接到某种载体上，可反复利用，反应液流经固定化酶。 研究 固定化酶、酶系、细胞、菌体，制成酶反应器（容器）、多酶反应器。 酶工程：酶的生产、制备和应用。 工具酶：DNA限制性内切酶与连接酶等。
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测酶诊病：血清淀粉酶（胰腺炎）、转氨酶（肝炎与心肌炎）、胆碱酯酶活性下降（有机磷农药中毒）。 疾病治疗：消化（胃蛋白酶等）、化脓性创口净化（胰蛋白酶等）。 青贮饲料：利用微生物体内酶的作用。增加营养。 作为分析试剂：应用于化学分析——酶法分析。分析某一底物的量如 糖。 自然界中不存在的抗体酶，人工模拟酶，化学酶等的研制，将使酶的应用前景更广。
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第四章 维生素与辅酶
维持机体正常生命活动不可缺少的一类小分子有机化合物。 需量少，不能自身合成，不是结构原料，也不是能源物质，只起调节代谢的作用，缺少之则物质代谢障碍，不能正常生长，产生缺乏病。
种类多，无相似的结构，按溶解性分为脂溶性和水溶性两大类：
脂溶性：A、D、E、K、硫辛酸（硫辛酸同时具有脂溶性与水溶性，还有预防心血管疾病、老年性痴呆、帕金森氏病、中风、糖尿病等作用，并有益于皮肤美容，延缓人体各重要器官的衰老）。
水溶性：B1、B2、B6、B12、C、叶酸、泛酸、生物素、Vpp。
主要作用是作为辅酶或辅基的组分，参与代谢的调节，尤其是VB1、VB2、Vpp、泛酸、叶酸几乎全部参与辅酶的组成。辅酶和辅基的作用是作为载体起转移电子、原子或化学基团的作用。 一、VB1与脱羧辅酶 VB1：含有嘧啶环和噻唑环。 O
R—C—COO-- NH2
H S 1 CH2 + N 3 N CH2—CH2OH （PP） 4 5
CH3 H3C N
因为噻唑环上含硫，嘧啶环上含氨基，所以叫硫胺素，其与ATP反应形成的焦磷酸硫胺素（TPP）即是α—酮酸脱羧酶、转酮醇酶的辅酶。
转二碳单位
TPP的噻唑环上的三位N的正电荷有助于二位C原子失去H+与α—酮酸中的羰基碳加成脱羧而生成醛，缺之产生脚气病：烦躁易怒、四肢麻木、下肢水肿、食欲不振、消化不良等。米糠、麦麸、白菜、芹菜、瘦肉中含量较多。吃精米、面易得脚气病。 二、VB2与黄素辅基 VB2含核糖醇基的黄色物质，所以叫核黄索，为核（糖）醇与6，7 — 二甲基异咯嗪的缩合物。
OH OH OH O CH 2 — CH — CH — CH 2O — P — O - 黄素单核苷酸（ FMN ） —CH 二甲苯 O N 核黄素（ V B2 ） N O H3C 1 —O—P O 黄素腺嘌呤二核苷酸（ FAD ） 10 N H N O H3C N 脲嘧啶 N NH2 比嗪 O CH2 O
N1与N10加H与脱H N N
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VB2作为氧化脱氢酶（黄素蛋白FP）的辅基组分，将氢从底物上脱下传给受体，缺乏时出现口角炎、舌唇炎（口疮）、角膜炎等。 青菜、黄豆、动物的心、肝、鸡蛋等中富含VB2。
D—氨基酸氧化酶、NAD+—细胞色素还原酶、琥珀酸脱氢酶、甘油—α-磷酸脱氢酶、酰基辅酶A脱氢酶等均以FAD为辅基，而羟基乙酸氧化酶（催化羟基乙酸氧化为乙醛酸）以FMN为辅基。 三、泛酸与辅酶A
遍多酸： CH3 O
CH2 — C — CH — C — NH — CH2 — CH2 — CO（OH）泛酸
O（H） CH3 OH NH—CH2—CH2—SH
COASH的—SH（代替OH） -O—P O
可与酰基形成硫酯，作为酰基
的载体，参与体内的转酰基反
O
应。
N 动植物中含有丰富的泛酸，肠 -O—P O N NH2
内细菌也能合成供人体利用，
所以人类极少发生泛酸缺乏
O — CH2 O 病。
N N
O 3′— P — 核糖
-O—P O -O
CoASH（由3′— P — 5′— PP —腺苷、泛酸和氨基乙硫醇结合而成），作为酰基的载体。与酰基形成硫酯。
硫辛酸（6，8—二硫辛酸： CH2 ）是α—酮酸氧化脱羧所必需的辅酶；还原型 CH2 CH2—（CH2）4—COOH S S 硫辛酸（HS—CH2—CH2—CH2—（CH2）4—COOH）因分子中有自由型的 —SH，故可解 SH 除砷、汞等毒物对巯基酶类的毒害。 O OH OH Vc：六碳酸性多羟基化合物。 C — C C—CH—CHOHCH2OH，因为C2、C3 O 上两个相邻的烯醇式羟基极易解离放出H+ ，所以其虽无羧基，但仍有有机酸的性质。又因为它有防止坏血病的功能，所以又叫抗坏血酸C2、C3上的羟基氢又可以氢原子形式释放，使物质还原，易被光、Fe++、Cu++或荧光物质（如核黄素）
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生物化学课件完整版（极其详细） - 图文
