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检验操作规程
题目：罗汉果原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20540-02 制定人： 制定日期2020 年 月 日 版本：2 页数：1/4 审核人： 审核日期2020 年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期2020年 月 日 生效日期2020 年 月 日 目的：规范罗汉果原药材检验操作 范围：罗汉果原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2020年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量:本品呈卵形、椭圆形或球形， 长4.5～8.5cm，直径3.5～6cm。表面褐色、黄褐色或绿褐色，有深色斑块和黄色柔毛，有的具6～11条纵纹。顶端有花柱残痕，基部有果梗痕。体 轻，质脆，果皮薄，易破。果瓤（中、内果皮）海绵状，浅棕色。种子扁 圆形，多数，长约1.5cm，宽约1.2cm；浅红色至棕红色，两面中间微凹陷， 四周有放射状沟纹，边缘有槽。气微，味甜。 【鉴别】 3 （1）显微鉴别 3.1 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。 3.1.1 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：（1）本品粉 3.1.2 末棕褐色。果皮石细胞大多成群，黄色，方形或卵圆形，直径7～38μm， 壁厚，孔沟明显。种皮石细胞类长方形或不规则形，壁薄，具纹孔。纤维 长梭形，直径16～42μm，胞腔较大，壁孔明显。可见梯纹导管和螺纹导管。 薄壁细胞不规则形，具纹孔。 （2）薄层鉴别 3.2 3.2.1 仪器与试剂：分析天平、数显恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱、层析缸、硅胶G薄层板、正丁醇、乙醇、甲醇等。 方法：（2）取本品粉末1g，加水50ml，超声处理30分钟，滤过，取3.2.2 滤液20ml，加正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，减压蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取罗汉果对照药材1g，同法 制成对照药材溶液。再取罗汉果皂苷V对照品，加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三 种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙醇-水（8：2： 3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛的10%硫酸乙醇溶液，加 热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 4 水分 不得过15.0%（通则0832第二法）。 4.1 仪器：电热鼓风干燥箱、分析天平、等。 4.1．1 方法：取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超4.1.2 过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100－105℃干燥 5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在
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上述温度干燥1小时，冷却，称重至连续两次称重的差异不超过5mg为止。 根据减失的重量，计算供试品中的含水量（%）。 4.1.3 计算公式： W样+W0－W1 样品含水量% = ×100% W样 式中： W0 ---------------------------- 称量瓶的重量（g）。 W1 --------------------------- 称量瓶与样品的重量（g）。 W样 --------------------------- 样品的重量（g）。 4.2 总灰分 不得过5.0％（通则2302）。 4.2.1 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 4.2.2 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中 称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～ 600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 4.2.3 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 4.3 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得 过150mg/kg 4.3.1 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、 分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L) 等。 4.3.2 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过 1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧 瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧 化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加 入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以 下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml), 并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则 应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min； 打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两 颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加 热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定 （O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实 验校正。 4.3.3 计算公式： 第 2 页 共 4 页
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5 5.1 5.2 5.3 6 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5
（V供-V空）×C×0.032×106 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g。 【浸出物】 照水溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，不得少于30.0%。 仪器与试剂：电热鼓风干燥箱、分析天平、蒸发皿、数显恒温水浴锅等。 方法：取供试品约2～4g，称定重量，置100～250ml的锥形瓶中，精密加入水50～100ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量（%）。 计算公式： （W1-W0）×V0 浸出物% = ×100% W样×（1－水分）×V1 式中： W0 ------- 蒸发皿的重量（g）。 W1 -------- 浸出物与蒸发皿的重量（g）。 W样------- 样品的重量（g）。 V0------- 加溶媒体积 （ml）。 V1------- 取续滤液的体积 （ml）。 【含量测定】 照高效液相色谱法（通则0512）测定。本品按干燥品计算，含罗汉果皂苷V （C60H102O29）不得少于0.50%。 仪器与试剂：电子分析天平、高效液相色谱仪、甲醇、乙腈等。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（23：77）为流动相；检测波长为203nm。理论板数按罗汉果皂苷V峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取罗汉果皂苷V对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液20ml，回收溶剂至干，加水10ml溶解，通过大孔吸附树脂柱AB-8（内径为1cm，柱高为10cm），以水100ml洗脱，弃去水液，再用20%乙醇100ml洗脱，弃去洗脱液，继用稀乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干， 第 3 页 共 4 页
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6.6 6.7 残渣加流动相溶解，转移至10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含罗汉果皂苷V （C60H102O29）不得少于0.50%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 m ------------------------- 样品的重量（g）。 f ------------------------- 稀释体积。
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YL-20540罗汉果原料检验操作规程
