绿色荧光蛋白基因转染骨髓基质干细胞的瞬时表达检测

绿色荧光蛋白基因转染骨髓基质干细胞的瞬时表达检测

蒋欣泉;张志愿;曹俊;陈传俊;王明国;周晓健;陈万涛

【期刊名称】《华西口腔医学杂志》 【年(卷),期】2003(021)002

【摘要】目的检测绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达载体pEGFP对MSCs的转染效率及瞬时表达,为利用pEGFP构建骨形成蛋白(BMP)表达载体并转染骨髓基质干细胞(MSCs)提供依据.方法在体外扩增并酶切鉴定pEGFP质粒;抽取兔骨髓,应用贴壁法培养MSCs;质粒与脂质体按照不同的比例混合,以脂质体介导法转染pEGFP,应用荧光显微镜观察转染效率及瞬时表达情况.结果转染效率与脂质体和质粒的比例有关,绿色荧光蛋白在基因转染24 h后开始表达,48～72 h最高,1周后表达逐渐减弱,但3～4周后仍有少量表达.结论按照合适的质粒和脂质体比例,pEGFP转染MSCs的效率可达到30%,并能持续表达3周以上,是转染MSCs较为理想的瞬时表达载体. 【总页数】3页(89-91)

【关键词】绿色荧光蛋白基因;骨髓基质干细胞;基因转染;脂质体 【作者】蒋欣泉;张志愿;曹俊;陈传俊;王明国;周晓健;陈万涛

【作者单位】200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科;200011,上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科