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双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收
的实验研究
作者：梁学政，奉建芳，陈惠红，吴昭璇
【摘要】 目的研究双柏凝胶剂中主要成分大黄素的透皮吸收特性，并考察了处方中其他成分对大黄素吸收的影响作用。方法采用改良的Franz扩散装置，以离体鼠皮为屏障、磷酸盐缓冲液为接受介质，研究了大黄提取物凝胶及双柏凝胶剂中大黄素透皮吸收性能。结果在大黄提取物和双柏凝胶剂中，大黄素12 h累积透皮释药为， μg·cm-1。结论大黄提取物凝胶中大黄素具有一定的透皮吸收，但不太理想，而双柏凝胶剂于其他组分的加入，促进了大黄素的吸收，从一个方面佐证了该处方制成凝胶剂的可行性。
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【关键词】 双柏凝胶剂； 大黄素； 透皮吸收
双柏散大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、薄荷组成，具有消肿止痛，活血化瘀之功效，主要用于治疗跌打损伤早期及疮疡初起红肿热痛等症［1］。传统的蜜调散剂使用时易污染衣物，且存在较多的过敏反应。为方便使用，同时为提高药物的生物利用度，我们将其制成双柏凝胶剂。以大黄提取物凝胶作对比，以大黄素为指标，考察了双柏凝胶剂透皮吸收情况，从而对双柏凝胶剂的体外吸收进行初步评价。 1 仪器与试药
仪器高效液相色谱仪：LC-10ATvp双泵，SLC-10Avp控制器，SPD-10Avp紫外检测器，CTO-10ASvp柱温箱。 试药大黄素对照品中国药品生物制品检定所提供(批号为0756-9908)；甲醇为色谱纯;大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、薄荷柳州市神农中药饮片厂提供，经柳州市中医院药检室鉴定，符合《中国药典》
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要求；其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果
凝胶剂的制备取处方量的大黄(A)和根据双柏散处方比例称取药材粗粉(B)，均加95%乙醇浸泡6 h，以5～7 ml/min的速度渗漉提取，相应渗漉液浓缩至约50 g，加入3 g 卡波姆940，密闭放置过夜使其充分溶胀，加蒸馏水至100 g，研匀即得。分装于密闭避光的容器中，贮存于凉处。A：大黄凝胶;B:双柏凝胶 建立测定方法 色谱条件
色谱柱为选Kromasil- C18 柱(5μm，250 mm× mm)；流动相为甲醇-水；流速 ml/min；检测波长254 nm；柱温30℃；进样量：10 μl。
对照品溶液制备
精密称取大黄素对照品5 mg，加甲醇溶解定容至25 ml，制成 mg/ml的溶液，即可。
供试品溶液制备
精密称取凝胶剂1 g，水浴浓缩至近
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干，加蒸馏水10 ml，浓盐酸1 ml，沸水浴中水解30 min，再加氯仿20 ml，超声振荡20 min，置分液漏斗中分层，取氯仿层；水层用氯仿洗3次，每次10 ml，合并氯仿液，挥干。加适量甲醇溶解，转移至10 ml容量瓶中，超声振荡数分钟使溶解完全，加甲醇至刻度，摇匀。针孔式微孔滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。 线性关系
考察精密吸取对照品溶液用流动相稀释成，，，， μg·ml-1进样10 μl测定，以大黄素进样量和峰面积进行线性回归，求得标准曲线的回归方程为：Y=3 422，r= 8。结果表明大黄素进样量在～10 μg·ml-1范围内有良好的线性关系。 精密度实验
精密吸取上述对照品溶液10 μl，重复进样测定5次，结果大黄素峰面积值的RSD=%，表明仪器精密度良好。 稳定性实验
取供试品溶液，于0，1，2，3 h分
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别进样测定峰面积，结果RSD=%。表明供试品在3 h内稳定。
体外透皮吸收方法 离体鼠皮的制备
取体质量20～22 g小鼠 ，乙醚麻醉，剪去背部毛，取皮肤剥离皮下脂肪及粘液组织,用生理盐水冲洗干净，备用。 接受液pH 的磷酸盐缓冲液。 体外透皮实验装置及方法
本实验采用 Franz扩散池装置。将备用鼠皮固定在扩散池的供应室与接受室之间，使角质层面向供应室，上下夹紧后在接受室中注满接受液，驱除气泡。在供应室中分别加入1 g样品凝胶(A )及( B)。开启电磁搅拌器连续搅拌,并保持水浴温度在( 32 ±0. 5 )℃。分别在 ，1，2，4，6，8，12 h取样4 ml，同时补加等量同温的新鲜接受液。 接受液含量测定
和累积透皮量的计算取接受液4 ml供试品溶液制备项下操作得到供试品溶
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双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收的实验研究
