三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究
作者：李红艳;周志明;潘强;杨冬梅;顾锦法;沈佳妮;王世兵;章康健 作者机构：浙江理工大学生命科学学院,新元医学与生物技术研究所,杭州310018;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031;浙江理工大学生命科学学院,新元医学与生物技术研究所,杭州310018;浙江理工大学生命科学学院,新元医学与生物技术研究所,杭州310018;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031;浙江理工大学生命科学学院,新元医学与生物技术研究所,杭州310018;浙江理工大学生命科学学院,新元医学与生物技术研究所,杭州310018;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031 来源：生物化学与生物物理进展 ISSN：1000-3282 年：2014 卷：041 期：006 页码：558-566 页数：9
中图分类：Q2;Q7 正文语种：chi
关键词：连接子多肽;IETD;EEED;F2A;caspase活性
摘要：IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1 (+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1 (+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子
介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-1inker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考.
三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究
