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M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用

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专业: 临床医学 姓名: 学号: 日期: 2013.3.21 地点: 教C 实验报告

课程名称: 生理科学实验 指导老师:唐法娣 成绩: 实验名称M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用 同组学生: 一、实验目的和要求(必填) 三、主要仪器设备(必填) 五、实验数据记录和处理 本人Email:

二、实验内容和原理(必填) 四、操作方法和实验步骤 六、实验结果与分析(必填)

M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用

(浙江大学医学院 级临床医学七年制生理科学实验 班 组,浙江 杭州 310058) [摘 要] 目的:观察胆碱能神经递质acetylcholine (Ach、乙酰胆碱),炎症介质histamine (His、组胺)对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏)对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。方法:应用液压传递系统直接测定动脉血压,通过压力换能器将压力变化转化为电信号变化,用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。结果:在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01);BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降。结论:阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。

[关键词] 动脉血压 血红蛋白 急性失血 1.材料

1.1 实验动物 豚鼠

1.2 药品 未标记的激动剂:A,B,C。10g/L氯化乙酰胆碱(acetylcholine chloride)溶液;10g/L磷酸组织胺(histamine phosphate)溶液;10g/L BaCl2溶液。拮抗剂:1g/L硫酸阿托品(atropine sulfate)溶液;10g/L氯苯那敏(chlorpheniramine)溶液。台氏液(Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。

1.3 器材 双层玻璃浴槽(20ml)、张力换能器 、微距调节夹,恒温水浴箱、多道生理

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信号采集处理系统,RM6240生物信号采集处理系统。 2.方法 2.1准备

清洗浴槽:清洗后,将台氏液装至刻度;检查温度:37℃±0.5 ℃;检查通氧: 单个小泡溢出; 打开电脑:选中桌面RM6240图标,选择“实验”---生理科学实验---肠肌。 2.2实验步骤

清醒豚鼠,轻击头部后股动脉放血,打开腹腔,取出回肠,制作回肠标本,一端固定在通气钩上,置含有37℃台氏液的浴槽中,通氧另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接,连接RM6240生物信号采集处理系统,选择“实验”---生理科学实验---肠肌,归零,调节换能器张力(1g),稳定20分钟。 2.3制作回肠标本

找到回盲部,在离回盲部1cm处剪断回肠,取出回肠约15cm左右一段,置于盛有台氏液的培养皿中,将回肠剪成1-1.5cm的小段。 2.4 回肠标本张力调节

将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上,放入麦氏浴槽中,选中桌面RM6240图标。选择“实验”--生理科学实验--肠肌 ,工具--快速归零(按右上快速归零Z)---调 “ 0” ,将RM6240系统处在记录状态;将回肠标本的上端连线打一活结,勾在张力换能器的悬臂梁钩上,旋转调节螺母,调张力至1g。(见左上显示平均1g左右)。 2.5 RM6240系统的使用

1.实验---生理科学实验--- 肠肌

2.记录、实验中用暂停, 实验结束用停止,停止后一定要另存为d或e盘。 3.标记:在标记窗内打上药名,加药时做好标记。 4.测量方法:选测量方法选择键---峰峰值测量 5.剪辑:按剪辑图标---选中---剪切 6.导出:文件---当前屏图像输出---到word 2.6 实验观察记录

① 待离体回肠稳定10min,记录一段正常收缩曲线。

②加A药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,加入拮抗剂阿托品 0.3ml,曲线稳定后加A药,记录一段曲线后,用台氏液连续冲 洗浴槽3次换液,稳定5min。

③加B药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,待曲线稳定后,加入拮抗剂氯苯那敏0.3ml,

观察5min,加B药,换液,稳定5min。

④加C药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,待曲线稳定后,加入拮抗剂阿托品0.3ml,观察3min,加C药,记录曲线。 请根据实验结果考虑进一步设计实验,并继续实验。 2.7 数据处理

1.数据测量:从加药前的基线到最高点的收缩幅度,测得峰峰值。 2.收集数据:离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据收集 3.导出实验图:文件---当前屏图像输出 2.8 统计

参考《生理科学实验教程》 p30应用Excel进行数据统计分析 t-检验,以?x ? s 表示。 3. 结果

3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图,见图1.图2.

图1.A药物对离体豚鼠回肠作用曲线图

图2.BC药物对离体豚鼠回肠作用曲线图

3.2 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响(数据统计表)见表1.

表1. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响

实验小组 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 x s 收缩幅度(g) A药 0.462 1.444 1.136 1.246 1.781 0.528 1.319 1.297 1.29 0.725 1.1228 0.421272358 Atr+A药 0.059 0.205 0.169 0.059 0.044 0.044 0.799 0.165 0.872 0.051 0.2467 0.316477505 收缩幅度(g) B药 0.147 2.4 0.242 1.385 1.516 0.806 1.24 1.37 1.26 1.106 1.1472 0.647297596 Chl+B药 0.059 0.242 0.088 0.227 0.337 0.044 0.676 0.242 0.967 0.139 0.3021 0.297046367 3.3 结果,见表2.

表2.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响

组别 乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 氯苯那敏+组胺 4.讨论

4.1A、B、C药分别为什么药?

根据实验结果,A药是乙酰胆碱,B药是组胺,C药是氯化钡。 4.2阿托品的作用和作用机制

阿托品与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与胆碱受体结合,从而产生抗胆碱作用。[1]

4.3氯苯那敏的作用和作用机制

氯苯那敏(扑尔敏):为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。在肠肌痉挛收缩时加入阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用,但无法阻断钙离子浓度上升导致的收缩,故肌张力依然维持在较高水平。

5. 参考文献

[2]

标本数 10 10 10 10 收缩幅度(g) 1.12±0.42 0.25±0.32 1.15±0.65 0.30±0.30 T检验值 6.78512E-05 0.002534156 [1]陆源,夏强等,生理科学实验教程(第二版).浙江:浙江大学出版社.2012.231. [2]唐法娣,药物对离体豚鼠回肠的作用(课件).

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