博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 高血压系列
运用化学发光免疫检测技术开展“高血压项目”
检测的可行性分析
一、开展“高血压项目检测”在医疗机构检测中的重要性
放射免疫分析技术开展肾素活性—血管紧张素—醛固酮系统（RRAS）测定，临床意义介绍如下：RAAS是人体血压、水和电解质平衡重要的调节系统，对维持人体内环境的稳定起着十分重要的作用。肾素在生理和许多病理情况下，其数量和活性决定了整个体系的活性，测定肾素活性因此成为RAAS活性的标志。实际工作中肾素活性的测定是通过测定血管紧张素I（Ang I）的量和在 37℃ 条件下1hAI的增加量（即肾素原被肾素催化转化为AI的量）来计算肾素活性的。肾素的主要生理功能是将血管紧张素原分解成Ang I，AI在血管紧张素转移酶（ACE）作用下转变成AngⅡ，并可引起醛固酮（ALD）分泌,以此发挥对机体血压的调节作用。ALD是肾素-血管紧张素系统的一个延伸部分，它也参与了高血压的发病过程。原发性醛固酮增多症患者，肾上腺因肿瘤或增生等原因大量分泌ALD，肾素分泌受抑制。临床上表现为高血压、低血钾。血、尿中ALd水平升高。
肾素--血管紧张素--醛固酮系统（RAAS）是由一系列激素及相应的酶组成,通过对血容量和外周阻力的控制，调节人体血压、水和电解质平衡，来维持机体内环境恒定。另外，它与一些肾脏疾病及与肾脏有关的一些疾病有密切的关系。目前检测血浆中肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和醛固酮（ALD）已成为原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及研究的重要指标。对一些有关肾脏疾病的诊断、治疗以及发病机理的探讨有着重要意义。
二、采用化学发光法检测“高血压项目”是医学检验技术的必然趋势
1. 本世纪70年代中期Arakawe首次报道用发光信号进行酶免疫分析，利用发光的化学反应分析超微量物质，特别是用于临床免疫分析中检验超微量活性物质。目前，这一技术已从实验室的稀有技术过渡到临床医学的常规检测手段。化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其检测原理
1
博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 高血压系列
与放射免疫（RIA）和酶免疫（EIA）相似，不同这处是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物，并藉助其自身的发光强度直接进行测定。 2. 临床实验数据对照案例： 2.1试验方案
试验目的：通过博奥赛斯试剂盒对临床样本（金域提供）的对比试验，验证博奥赛
斯试剂与金域现用试剂是否等效，从而验证博奥赛斯试剂和进口试剂的测值相关性。
试验项目：博奥赛斯醛固酮（ALD）定量检测试剂盒（化学发光法）（以下简称博奥
赛斯ALD）
博奥赛斯血管紧张素Ⅰ（AngⅠ）定量检测试剂盒（化学发光法）(以下简称博奥赛斯PRA)
博奥赛斯血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）定量检测试剂盒（化学发光法）(以下
简称博奥赛斯AngⅡ)
对照试剂：贝克曼（Beckman Coulter）ALD放射免疫试剂（以下简称Beckman ALD） 索林（DiaSorin）血浆肾素活性放射免疫试剂（以下简称DiaSorin PRA） 伯乐免疫测定质控品三水平（371,372,373）（以下简称伯乐质控品） 美国病理学家协会（College of American Pathologists，CAP）尿样本室间
质评（2012年）（以下简称CAP 尿样室间质评）
试验样本：金域当天新鲜检测样本，样本量应足够进行比对试验。试验前去除严重
溶血、脂血、黄疸和染菌的样本。
试验方法：双盲法。 2.2试验结果与结论
2.2.1醛固酮（ALD）定量检测试剂盒（化学发光法） 2.2.1.1分析灵敏度、剂量反应曲线性
同时测定10个校准品零值（S0），计算发光值的平均值X与标准偏差SD。计算
X-2SD，从校准品曲线中得出其对应浓度值即为分析灵敏度。
2
博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 高血压系列
S0发光值 2975594 3098946 2896896 3160725 3185593 3229144 3077668 3137982 2990420 3013787 表1 ALD分析灵敏度、线性 校准品浓度发光值 （pg/mL） 25 2622225 2456235 75 1979591 1963318 210 1242804 1231795 650 557883 517335 1500 262278 263060 参数 ｜r｜ XS0 SDS0 分析灵敏度 0.9995 3076676 105600.1 13.7 本次试验分析灵敏度为13.7pg/mL，｜r｜=0.9995. 2.2.1.2精密度（CV%）
10孔平行测定高值和低值的样本，计算测定值的平均浓度（X）与标准差（SD）。批内不精密度（CV %）= SD／X×100%
表2 ALD精密度 样本1 样本2 （2010-5-30 75160） （2010-5-30 75180） 发光值 测定值 发光值 测定值 1817980 115.98 2186680 70.65 1809837 126.29 2225978 66.38 1802299 129.84 2114100 76.64 1804197 129.45 2117125 76.13 1828486 124.53 2174596 71.45 1874899 115.67 2146345 75.3 1875937 115.48 2123842 78.03 1831369 125.45 2096379 81.49 1773696 130.91 2106238 80.23 1827748 124.68 2122615 78.18 75.45 123.83 6.02 4.67 4.86% 6.20% 孔数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 X SD CV% 样本1,2的变异系数分别为4.864%，6.20%. 2.2.1.3测值重复性
取10~20份新鲜样本，将每份样本分装成3~5份。每天测定一次，连续3~5天。计算每个样本测定值的CV%.
3
博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 高血压系列
样本号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 75128 75104 75105 75106 75155 75108 75109 75156 75157 75158 75159 放免测定值（pg/mL） 770 116 273 575 794 235 62 218 58 77 90 表3 ALD测值重复性 2012-6-1高血压样本 6-2 6-4 6-7 X测定值 测定值 测定值 1339.99 1183.67 1262.59 1262.08 164.96 154.45 175.64 164.78 165.52 173.35 153.07 170.15 365.53 397.76 341.49 357.33 1108.32 1038.14 1106.46 1084.31 260.95 279.25 246.47 257.12 56.47 60.31 53.65 55.44 87.46 94.87 83.93 83.59 91.2 98.06 85.63 89.91 53.01 58.34 49.85 50.84 177.75 185.47 165.63 182.14 SD 78.16 10.6 10.9 29.02 39.99 16.72 3.45 6.42 6.31 4.64 10.62 CV% 6.19% 6.43% 6.59% 7.94% 3.69% 6.41% 6.11% 7.34% 6.92% 8.75% 5.97% 测得2012年6月1号金域高血压样本11个，分别于6月2号、4号、7号测定，分别计算CV%,结果在3.69%~8.75%之间。 2.2.1.4准确性
2.2.1.4.1测定伯乐质控品
表4 ALD测定伯乐质控品 伯乐质控品 测定值Beckman Coulter测定范围 是否在质控（批号40250） （pg/mL） （pg/mL） 范围内 371 79.18 <87.0 是 371 200.26 130-296 是 373 400.47 281-688 是 2.2.1.4.2测定CAP 尿样室间质评
表5 ALD测定CAP 尿样室间质评 CAP 尿样室间质评 测定值 CAP提供ALD测定范围 是否在质控范（2012） （ug/L） （ug/L） 围内 N-01 47.9 36.7-100 是 N-02 17.7 13.5-35 是 N-03 19.7 14.1-34.2 是 2.2.1.5与Beckman Coulter测定值的临床符合率。
4
博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 高血压系列
本次测定金域高血压样本213个，分别根据Beckman ALD，和博奥赛斯ALD说明书中普食立位的参考值判断样本值，判断样本值属于正常，偏高或者偏低。结果如下表。
表6 ALD临床符合率（具体结果见附件一） 低值样本数 正常样本数 高值样本数 213例 21 174 18 符合例数 17 162 17 不符例数 4 12 1 临床符合率 92.00% 2.2.1.6结论
2.2.1.6.1博奥赛斯ALD试剂灵敏度为13.7pg/mL、批内不精密度4.864%，6.20%、测值重复性的不精密度在3.69%~8.75%之间、剂量反应曲线线性0.9995、测定伯乐质控品值，CAP室间质评值均在要求范围之内。
2.2.1.6.2博奥赛斯ALD试剂和Beckman ALD试剂进行临床对比试验，符合性大于90%，说明两种试剂测值符合性良好。
2.2.2血管紧张素Ⅰ（AngⅠ）定量检测试剂盒（化学发光法） 2.2.2.1分析灵敏度、剂量反应曲线性
同时测定10个校准品零值（S0），计算发光值的平均值X与标准偏差SD。计算
X总数 213 196 17 -2SD，从校准品曲线中得出其对应浓度值即为分析灵敏度。
表7 AngⅠ分析灵敏度、线性 校准品浓度发光值 参数 （ng/mL） 0.3 0.9996 3003964 3263092 ｜r｜ 1.5 1956863 2079875 6672183 XS0 5.5 140375.7 1073156 1129713 SDS0 20 0.02 509359 560683 分析灵45 231362 250825 敏度 S0发光值 7006310 6807618 7026469 6809113 7191726 6813222 7030837 6928237 6809544 7106263 本次试验分析灵敏度为0.02ng/mL，｜r｜=0.999。 2.2.2.2精密度（CV%）
5
开展“高血压”化学发光免疫检测技术可行性分析20120712
