人TRBP基因在HEK-293细胞中的表达

人TRBP基因在HEK-293细胞中的表达

李俊堂;王立锋;王芳;许彦鸣;杨安钢

【期刊名称】《第四军医大学学报》 【年(卷),期】2009(030)021

【摘要】目的:构建携带人TRBP(TAR RNA结合蛋白)基因的真核表达载体,并将其在HEK-293细胞中表达.方法:用RT-PCR的方法扩增获得TRBP全长cDNA,然后克隆入pFLAG-CMV4真核表达载体.脂质体法瞬时转染HEK-293细胞,间接免疫荧光和Western Blot检测目的蛋白表达.结果:成功获得了全长的TRBP cDNA,构建了含人的TRBP cDNA的真核表达载体.转染HEK-293细胞后提取蛋白,经电泳观察到在Mr 46 000存在与目的蛋白分子质量相符的条带,该条带可被抗TRBP多克隆抗体及抗FLAG mAb特异性识别.结论:TRBP哺乳动物表达系统的建立,为进一步研究TRBP的生物学效应奠定了基础. 【总页数】3页(2263-2265)

【关键词】TAR RNA 结合蛋白;pFLAG-CMV4;基因表达;HEK-293 细胞 【作者】李俊堂;王立锋;王芳;许彦鸣;杨安钢

【作者单位】第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西,西安,710033 【正文语种】中文