柔嫩艾美耳球虫LZ株MIC-5基因的克隆与表达

柔嫩艾美耳球虫LZ株MIC-5基因的克隆与表达

孟庆玲;乔军;才学鹏;景志忠;田广孚;闫鸿斌

【期刊名称】《甘肃农业大学学报》 【年(卷),期】2007(042)006

【摘要】提取柔嫩艾美耳球虫兰州株孢子化卵囊总RNA,运用RT-PCR技术扩增EtMIC-5基因片段进行测序,并克隆人大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达.结果表明,该基因片段长918 bp,编码306个氨基酸.与GenBank报道的柔嫩艾美耳球虫Houghton株MIC-5基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列同源性为99.2%和99.6%.在推导的MIC-5氨基酸序列中,第15～89、90～160、173～242和245～306位保守的cys残基形成4个Apple样结构域(A-domain),推测该蛋白可能在虫体与宿主细胞的黏附中起重要作用.转化重组质粒pETMIC-5的BL21(DE3)经IPTG诱导后,SDS-PAGE和western blot分析证实目的蛋白成功表达,重组蛋白的表达量可占菌体蛋白的15.2%. 【总页数】5页(8-12)

【关键词】柔嫩艾美耳球虫;微线蛋白5基因;克隆;表达 【作者】孟庆玲;乔军;才学鹏;景志忠;田广孚;闫鸿斌

【作者单位】中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病