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激光共聚焦显微镜的使用和管理
作者：王炜
来源：《科技资讯》2011年第21期
摘 要:阐述了LEICA TCS SP5共聚焦显微镜的组成、工作原理、样品制备方法,提出了该激光扫描共聚焦显微镜的日常维护和管理方法。 关键词:共聚焦显微镜 使用 管理
中图分类号:TN16 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2011)07(c)-0116-01
激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)是随着计算机技术和光电技术的飞跃发展,在20世纪80年代后期发展起来的。在生命科学研发中,LSCM技术已经成为生物医学中一个标准的研究工具。目前共聚焦显微镜的功能非常多,好像是一个科研工作站,其应用也大多在生命科学研究领域。围作为大型贵重精密仪器,LSCM的日常使用的管理需要按照严格的规程来实施,LEICA TCS SP5共聚焦显微镜的使用及管理方法如下。
1 了解仪器的组成
所有上机操作的人员必须经过培训,了解仪器组成、工作原理和操作规范方可上机。 1.1 仪器的组成
LEICA TCS SP5主要由四部分组成:(1)显微镜光学系统。为倒置显微镜;镜头包括共聚焦专用平场复消色差10×,20×,40×,63(油镜),100×(油镜)镜头;(2)扫描装置;(3)激光光源。本机器包含4个激光器:405nm激光,氩离子激光(457,476,488和514nm),561nm激光,氦氖633nm激光,共四个检测通道;(4)检测系统。整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活进行。由于激光器在工作时散发大量的热,需要风扇降温,突然断电可能烧坏激光器,因此还需要配备稳压电源和不间断供电装备。 1.2 工作原理
LSCM的工作原理是:照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,激光光源经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本内焦平面上的每一点进行扫描。然后,激发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过探测针孔时先聚焦,聚焦后的光被光电倍增管
激光共聚焦显微镜的使用和管理
