纤维蛋白原FIB检测2
用途
用于人血浆纤维蛋白原定量测定及用于免疫血液学研究中加速抗凝样本的凝固。 概要和解释
纤维蛋白原水平降低见于获得性或先天性低或无纤维蛋白原血症。获得性纤维蛋白原缺乏特别见于血管内纤维蛋白原分解，如凝血酶（消耗性凝血性疾病，如妇产科外科术后），蛇毒或纤溶酶（链激酶或尿激酶或tPA治疗产生的原发性纤维蛋白溶解亢进）。而且，中度低纤维蛋白原血症见于产生减少（急性或慢性肝病），血管内间隙缺失（如腹水或急性出血和烧伤）或降解增加（休克或癌症）。
暂时的纤维蛋白原升高见于“急性相蛋白”纤维蛋白原的结果：
a) 暂时的高纤维蛋白原血症可见于手术后、创伤、心肌梗死和感染。 b) 持续性高纤维蛋白原血症可见于肿瘤和慢性感染性疾病。 纤维蛋白原水平随年龄轻度增加。
纤维蛋白原水平增高是冠心病一种危险因子。 方法学原理
凝血酶能转换可溶性血浆蛋白成不溶性聚合物，纤维蛋白。稀释血浆的凝固时间与血浆纤维蛋白原浓度成反比。通过采用此原理，Clauss建立了纤维蛋白原测定的简单方法，加入稀释酶后，稀释血浆形成凝固时间。本方法中凝固时间与标准化纤维蛋白原制剂进行比较。 标本
将9份静脉血和1份枸橼酸钠（0.11mol/L）小心混合以获得血浆，避免泡沫产生。采集后，立即按1500×g至2500×g离心10到15分钟离心血液标本，并吸出上清液。血液采集操作也可参考见CLSI文件H21-A4。若立即进行检测，血浆可以残留在压积细胞中或分离。为了分离血浆，采用塑料移液管，抽取血浆至塑料试管内，2～8℃保存。不能放在冰块上。 虽然研究显示，血浆标本贮存在4℃超过72小时不影响检验结果，但是，仍建议标本采集后尽快完成检测。
操作步骤
纤维蛋白原测定 手工法
用缓冲液按1：10稀释病人和质控血浆。 按下列步骤移液入预温试管： 标本血浆（1：10稀释） 质控血浆（1:10稀释） 凝血酶试剂（贮存在15-25℃） 病人血浆 0.2ml － 质控血浆 － 0.2ml 37℃水浴孵育1-2分钟或37℃加热器中2-4分钟（不超过5分钟） 0.1ml 加入凝血酶同时启动秒表 0.1ml 通常样本和质控都应进行双份测定。 计算标准曲线
标准人血浆用缓冲液作1：4到1:32倍稀释。每次使用清洁的移液管，小心混合试管中内容物。
举例：
检测管 缓冲液 标准人血浆 第一管移液量 稀释比例 转换因子** 1 1.5ml 0.5ml — 1：4 ×2.5 2 0.4ml — 0.6ml 1：6 ×1.5 3 0.6ml — 0.4ml 1：10 ×1 4 0.3ml — 0.1ml 1：16 ×0.625 5 0.7ml — 0.1ml 1：32 ×0.312
**每个标准相对于1：10稀释的纤维蛋白原浓度为标准人血浆浓度乘以各自的转换因子。 这些稀释度是用来建立标准曲线而不是病人或质控血浆的1：10稀释。在双对数纸上，点上5个浓度的平均凝固时间。在x轴上记录纤维蛋白原浓度，y轴上记录秒数。连接这些点制成参考曲线。
在更换设备或新批号凝血酶试剂时应重新计算参考曲线。
室内质量控制
有病人样本测试期间至少每8小时应进行两个水平（1份为正常范围，1份为病理范围）质控分析。新校准曲线或更换试剂后应质控分析。若质控值超出靶值范围，有必要重新定标。当质控超限时，请勿报告检测结果。
计算分析结果（手工方法）
通过校准曲线及用1：10稀释血浆得出凝固时间来获得病人血浆的纤维蛋白原浓度。
1、 若得出的时间很短（高浓度纤维蛋白原），1：20稀释血浆（0.1ml＋1.9ml缓
冲液），再次检测。然后，g/l结果乘以曲线上稀释因子（2）。
2、 若得出的时间很长（低浓度纤维蛋白原），1：5稀释血浆（0.2ml＋0.8ml缓冲
液）或1:2（0.4ml＋0.4ml缓冲液）。然后，g/L结果除以稀释因子（2或5）。
3、 1：2稀释血浆未出现凝固提示纤维蛋白原浓度小于0.15g/L。
肝素化的病人样本的凝固 用说明，加入适量的干凝血酶于全血和分离血浆中，或者每毫升样本中加入1至2滴（0.1ml）复溶的凝血酶试剂（100U/mL）。混匀并37℃孵育5至10分钟。
方法局限性
以下物质不会产生干扰： 胆红素 ～60mg/dL 游离血红蛋白 ～600mg/dL 甘油三脂 ～728mg/dL 肝素（LMW） ～0.4U/mL 肝素（未分馏）～0.6U/mL
病人血浆中出现肝素或纤维蛋白（原）降解产物将影响检测结果。实验中出现一定量的这些物质可引起纤维蛋白原假性降低。
检测结果须结合患者病史、临床表现及其他症状作出合理解释。
参考值 1.8-3.5g/L
各实验室间的参考范围会因检测人群的不同以及所用的技术、方法、仪器和试剂批号的不同而不同。因此，每个实验室必须建立自身的参考范围。
纤维蛋白原FIB检测2
