掌握操作技术，解答微生物的利用试题
1．下列有关平板划线接种法的操作错误的是( ) A．将接种环放在火焰上灼烧
B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 2．有关涂布平板法，叙述错误的是( ) A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C．再放在适宜条件下培养
D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落 3．平板冷凝后要将平板倒置，其原因是( ) A．接种时再拿起来方便 B．在皿底上标记日期等方便 C．正着放置容易破碎
D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 4．高温灭菌的原理是( )
A．每种微生物生长的最适温度是一定的 B．每种微生物对高温环境都不适应
C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动 D．高温降低了环境中氧的浓度
5．下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是( ) A．在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落 B．在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒 C．土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌
D．在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
6．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是( ) A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B．同一浓度的土壤稀释液应最多涂布三个平板 C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D．可用显微镜观察计数来测量尿素分解菌的数量
7．某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是( )
A．利用平板划线法对细菌进行计数 B．以石油为唯一碳源的培养基筛选 C．采用涂布平板法分离菌种 D．称取和稀释土壤样品时应在火焰旁
8．下列有关平板划线操作的叙述中，不正确的是( )
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
9．用涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比( ) A．比实际值高 B．比实际值低 C．和实际值一致
D．可能比实际值高，也可能比实际值低
10．在做分离分解纤维素的细菌实验中，加入刚果红应该在( ) ①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时 A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤
11．(2017·重庆一中模拟)大肠杆菌是一种兼性厌氧菌，在无氧条件下，发酵能将葡萄糖转换成多种有机酸并生成二氧化碳，某研究机构利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。
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回答下列相关问题：
(1)研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为____________________。
(2)图乙滤膜的孔径应________(填“大于”“小于”或“等于”)大肠杆菌。
(3)制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，培养基的灭菌方法是____________，待培养基冷却至________℃左右时进行倒平板。
(4)为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入______________染料，该研究机构通过统计________色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值________(填“偏高”“偏低”或“相等”)理由是___________________
12．(2017·昆明市调研)牛、山羊等反刍动物的瘤胃中生活着多种厌氧微生物。为了分离出高效的纤维素分解菌，科学家从牛瘤胃中获取内容物，经过选择培养后，接种在鉴别培养基上初筛分离得到5个菌株，观察结果如下：
菌株编号 1 2 3 4 5 回答下列问题：
(1)将选择培养后的菌种接种在经__________________法灭菌的鉴别培养基上。培养基成分中的纤维素能与________形成红色复合物，该培养基属于__________(填“液体”或“固体”)培养基。
(2)据表分析，________号菌株最可能具有较高产纤维素酶的能力且酶活性也较高，理由是______________。为确定此结论可继续进行实验，对纤维素酶分解纤维素后所产生的________进行定量测定。
13．(2017·东莞模拟)从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。
透明圈直径R 0.4 1.1 2.0 2.1 0.55 菌株直径r 0.3 0.6 0.8 0.9 0.3 R/r 1.3 1.7 2.5 2.3 1.8 3
(1)接种前要对培养基进行______________处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在________条件下进行。
(2)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从______________的环境中采集。 (3)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制________培养基(按用途分类)，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的________。
(4)经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是________，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是________。
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答案精析
1．D [将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，B正确；蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区相连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错误。] 2．D
3．D [微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，故选D。]
4．C [蛋白质是生命活动的主要承担者，遗传物质DNA控制蛋白质的合成，高温会破坏蛋白质和核酸的空间结构，使它们变性失活，因此高温灭菌的原理是：破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动，C项正确。]
5．A [在固体培养基上涂布稀释后的菌液能够得到单个菌落，A项正确；在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气，有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B项错误；牛肉膏蛋白胨培养基是普通的培养基没有选择功能，应在以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌，C项错误；在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物全部被杀死，不能用于制取土壤稀释液，D项错误。]
6．B [为防止土壤浸出液浓度过高，不能获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，B错误；可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以判断培养基灭菌是否彻底，C正确；可以用显微镜观察计数来测量尿素分解菌的数量，D正确。]
7．A [分离菌种常用的接种方法是平板划线法和涂布平板法，但对活菌进行计数常用涂布平板法而不能用平板划线法，所以A项错误。阅读题干可知实验目的是筛选出能分解石油的细菌，培养基的配方应以石油为唯一碳源，所以B项正确。对微生物进行分离和计数，应该用涂布平板法，所以C项正确。微生物的分离和培养的关键技术是无菌技术，因此在微生物的分离和培养的过程中称取和稀释土壤等活动要在火焰旁进行，所以D项正确。] 8．C [平板划线操作中，接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种。划线结束仍需灼烧接种环，是为了能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。]
9．B [用涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只是一种估测，根据此方法的实验过程可知，在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶然性，并不是绝对均匀的，所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌体数的真实值。用涂布平板法来统计样品中活
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2018年高考生物 重难点突破强化练 第71练 掌握操作技术,解答微生物的利用试题 苏教版
