A2.10 水浴箱
A3 采样
A3.1 采样容器：可选择玻璃瓶或聚乙烯瓶，沉积物与软泥需用广口瓶，容器均需螺口或磨口，用前灭菌。
A3.2 采样量：每个采样点依无菌操作取水样（或沉积物、软泥等样品）约200ml。
A3.3 中和：经氯或臭氧等消毒的样品，采样容器灭菌前加入硫代硫酸钠溶液以中和样品中的氧化物。 A3.4 样品运输与贮存：样品最好2天内送达实验室，不必冷冻，但要避光和防止受热，室温下贮存不得超过15天。
A4 方法与步骤 A4.1 样品处理
A4.1.1 沉淀或离心：如有杂质可静置沉淀或1000r/min离心1min去除。
A4.1.2 过滤：将经沉淀或离心的样品通过孔径0.22～0.45μm滤膜过滤，取下滤膜置于15ml灭菌水中，充分洗脱，备用。
A4.1.3 热处理：取1ml洗脱样品置50℃水浴加热30min。
A4.1.4 酸处理：取5ml洗脱样品，调pH至2.2，轻轻摇匀，放置5min。
A4.2 接种与培养：取A4.1.2洗脱样品、A4.1.3 热处理样品及A4.1.4 酸处理样品各0.1ml，分别接种GVPC平板。将接种平板静置于CO2培养箱中，温度为35~37℃，CO2浓度为2.5%。无CO2培养箱可采用烛缸培养法。观察到有培养物生成时，反转平板，孵育10天，注意保湿。
A4.3 观察结果：军团菌生长缓慢，易被其它菌掩盖，需每天在体式镜上观察。军团菌的菌落颜色多样，通常呈白色、灰色、蓝色或紫色，也能显深褐色、灰绿色、深红色；菌落整齐，表面光滑，呈典型毛玻璃状，在紫外灯下，有荧光。
A4.4 菌落验证：从每一个平皿上挑取2个可疑菌落，接种BCYE和L－半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板，35~37℃培养2天，凡在BCYE琼脂平板上生长而在L－半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板不生长的则为军团菌菌落。
A4.5嗜肺军团菌型别的确定：应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养：氧化酶（－/弱+），硝酸盐还原－，尿素酶－，明胶液化＋，水解马尿酸。血清学实验：用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。
附录B 新风量检测方法
本附录规定了集中空调通风系统新风量的检测方法——风管法，即直接在新风管上测定新风量。
B1 原理
在集中空调通风系统处于正常运行或规定的工况条件下，通过测量新风管某一断面的面积及该断面的平均风速，计算出该断面的新风量。如果一套系统有多个新风管，每个新风管均要测定风量，全部新风管风量之和即为该套系统的总新风量（立方米/小时），根据系统服务区域内的人数，便可得出新风量结果（立方米/人2小时）。
B2 主要仪器 B2.1 皮托管法
B2.1.1 标准皮托管： =0.99±0.01，或S型皮托管 =0.84±0.01。
B2.1.2 微压计：精确度应不低于2%，最小读数应不大于1 Pa。 B2.1.3 水银玻璃温度计或电阻温度计：最小读数应不大于1°C。 B2.2 风速计法
B2.2.1 热电风速仪：最小读数应不大于0.1m/s。
B2.2.2 水银玻璃温度计或电阻温度计：最小读数应不大于1°C。
B3 检测断面和测点
B3.1检测断面应选在气流平稳的直管段，避开弯头和断面急剧变化的部位。 B3.2测点位置和数量
B3.2.1圆形风管：将风管分成适当数量的等面积同心环，测点选在各环面积中心线与垂直的两条直径线的交点上，同心环数及测点数的确定见表B1。直径小于0.3米、流速分布比较均匀的风管，可取风管中心一点作为测点。气流分布对称和比较均匀的风管，可只取一个方向的测点进行检测。
表B1 圆形风管的环数及测点数
风管直径（米） ≤1 ＞1~2 ＞2~3 环数（个） 1~2 2~3 3~4 测点数（两个方向共计） 4~8 8~12 12~16
B3.2.2 矩形风管：将风管断面分成适当数量的等面积小块，各块中心即为测点。等面积小块的数量和测点数的确定见表B2。
表B2 矩形风管的分块及测点数
风管断面面积（m） 2等面积小块数（个） 232 333 334 434 测点数（个） 4 9 12 16 ≤1 ＞1~4 ＞4~9 ＞9~16
B4 检测步骤 B4.1 风管截面面积测量
测定风管检测断面面积（F），分环或分块确定检测点。 B4.2 皮托管法测定风速与风量
B4.2.1 准备工作：检查微压计显示是否正常，微压计与皮托管连接是否漏气。
B4.2.2 动压（Pd）的测量：将皮托管全压出口与微压计正压端连接，静压管出口与微压计负压端连接。将皮托管插入风管内，在各测点上使皮托管的全压测孔正对着气流方向，偏差不得超过10°，测出各点动压。重复测量一次，取平均值。
B4.2.3 新风温度（t）的测量：一般情况下可在风管中心的一点测量。将水银玻璃温度计或电阻温度计插入风管中心测点处，封闭测孔，待温度稳定后读数。
B4.2.4 新风量（Q）的计算：新风管某一断面的新风量按下式计算。
B4.3 风速计法测定风速与风量
当风管内的动压值 小于4 Pa时，可用热电风速仪测量风速。
B4.3.1 准备工作：调节风速仪的零点与满度。
B4.3.2 风管内平均风速（ 算术平均值作为检测结果。
）的测定：将风速仪放入风管内，测定各测点风速，以全部测点风速
B4.3.3 新风量（Q）的计算：新风管某一断面的新风量按下式计算。
式中：Q— 新风量(m/h)
F— 风管截面面积(m)
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— 风管中空气的平均风速(m/s)
附录C
送风中可吸入颗粒物检测方法
本附录规定了集中空调通风系统送风中可吸入颗粒物（PM10）浓度的检测方法。
C1 仪器
C1.1 PM10检测仪器为便携式直读仪器。
C1.1.1 检测仪器颗粒物捕集特性应满足Da50=10±0.5mm，sg=1.5±0.1的要求。
Da50 — 仪器捕集效率为50%时所对应的颗粒物空气动力学直径
sg — 仪器捕集效率的几何标准差 C1.1.2 检测仪器测定的重现性误差：平均相对标准差小于7%。 C1.1.3 检测仪器与称重法比较，总不确定度（ROU）不应大于25%。
ROU=∣b∣+2∣MVC∣ 式中：b — 重量法与仪器法配对测定PM10结果相对误差的算术平均值
MVC — 仪器法测定PM10结果之间相对误差的几何平均值
C1.1.4 仪器测定范围0.01~10mg/m。
C1.1.5 检测仪器示值不是质量浓度的，须给出符合要求的质量浓度转换系数(K)值。 C1.2 仪器使用前，应按仪器说明书要求进行检验与标定。
C2 检测点布置
C2.1 检测点在送风口散流器下风方向15~20cm处，根据检测点数量采用对角线或梅花式均匀布置。 C2.2 送风口面积小于0.1m的设置3个检测点，送风口面积在0.1m以上的设置5个检测点。
C3 检测时间与频次
C3.1 检测应在集中空调通风系统正常运转条件下进行。 C3.2 每个检测点检测3次。
C3.3 每个数据测定时间根据送风中PM10浓度、仪器灵敏度、仪器测定范围确定。 C4 检测数据处理
C4.1 对于非质量浓度示值的测定值，按仪器说明书要求将每次检测示值转换为质量浓度。
C = R′K 式中：C — 质量浓度，mg/m
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公共场所集中空调通风系统卫生规范(WS+394-2012)
