高考生物_总复习备考优选重难点课件之49 生物技术实践_微生物的培养与应用
考纲要求 1．微生物的分离和培养 2．某种微生物数量的测定 3．培养基对微生物的选择作用 考情分析 2017，全国卷Ⅰ，37T 2016，全国卷Ⅰ，39T 2016，全国卷Ⅲ，39T 2016，四川卷，10T 2015，全国卷Ⅰ，39T 分值：12～15分 命题趋势 微生物的分离和培养在新课标高考试卷中出现频率较高，试题主要以非选择题的形式围绕培养基的种类和功能、微生物分离的方法和原理、平板划线法和稀释涂布平板法的比较、透明圈的大小与分解能力或抗菌能力的关系等内容进行命题，试题难度一般不大 对微生物的筛选与计数的考查多以非选择题的形式与微生物的分离、培养等内容相结合进行考查
一、微生物的实验室培养 1．培养基
?1)概念：人们按照微生物对__营养物质__的不同需求，配制出供其生长繁殖的__营养基质__。 一般都含有水、碳源、氮源、无机盐??
?2)成分?还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质
?? 以及氧气的需求
??！！！ 固体培养基 ###：含凝固剂
?3)分类?
?液体培养基：不含凝固剂?
2．无菌技术
?1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 ?2)关键：__防止外来杂菌的入侵__。 3．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏
?1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→称量→溶化→__灭菌__→__倒平板__。 ?2)纯化大肠杆菌
①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成__单个细胞__，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
②方法：__平板划线法__、__稀释涂布平板法__。 ?3)菌种的保藏
①短期保存：__固体斜面培养基__上4 ℃保存，菌种易被污染或产生变异。 ②长期保存：__甘油瓶__中－20 ℃在冷冻箱中保藏。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
1．菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。
2．统计菌落数目：常用方法有__稀释涂布平板法__、显微镜直接计数法。
3．细菌分离与计数的实验流程
土壤取样→配制__培养基__→微生物的培养与观察→细菌的计数。 三、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶
?1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括__C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶__。 ?2)作用
2．菌种筛选
?1)方法：__刚果红染色法__。 ?2)原理
即使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据__是否产生透明圈__来筛选纤维素分解菌。 3．筛选流程
土壤取样：富含__纤维素__的环境 ↓
选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量 ↓ 梯度稀释 ↓
涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上 ↓
挑选产生透明圈的菌落：产生__纤维素酶__的菌落周围出现透明圈
1．判断正误，正确的画“√”，错误的画“×”。
?1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。? × ) ?2)培养基分装到培养皿后进行灭菌。? × )
?3)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。? ×?4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。? √ ) ?5)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。? √ ) 2．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是? B )
成蛋葡K2H伊美蒸馏分 白胨 萄糖 PO4 红 蓝 水 含量 10 g 10 g 2 g 00．1 000 ．4 g 065 g mL ) A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨 C．该培养基缺少提供生长因子的物质 D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
解析 从用途看该培养基属于鉴别培养基；蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用。
3．?2015·四川卷)下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是? C ) A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2 B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精 C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰 D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板
解析 探究酵母菌种群数量变化，需定时取样计数，不需设置空白对照，C项错误。
一 微生物的培养和分离 1．培养基的种类、用途及配制原则 ?1)按物理状态分类
培养基种类 液体培养基 固体培养基 半固体培养基 ?2)按功能分类 种类 选择 培养基 制备方法 培养基中加入某些化学物质 原理 依据某些微生物对某些物质的抗性而设计 依据微生物产生的某鉴别 培养基 培养基中加入某种指示剂或化学药品 种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 ?3)培养基的配制原则 ①目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 ②营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。
③pH要适宜：细菌为6．5～7．5，放线菌为7．5～8．5，真菌为5．0～6．0，培养不同微生物所需pH不同。 2．微生物的纯化培养——平板划线法与稀释涂布平板法 方法 注 平板划线法 ?1)接种环的灼烧：①第一次划线前：杀死接种稀释涂布平板法 ?1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、鉴别不同种类的微生物 伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 用途 从众多微生物中分离所需的微生物 举例 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 特点 不加凝固剂 加凝固剂 ?如琼脂) 用途 工业生产 微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏 观察微生物的运动、分类、鉴定
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