2007 - 2008 学年第 一 学期本科试卷
课程名称:工业微生物学实验(A) ―――――――――――――装――――――――――――订――――――――――――线―――――――――――――― 题号 得分 得分 一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩 学 院: 专 业: 学号: 姓名: 一、填空题(共30分,其中8和11小题每空1分,其余每空0.5分) 1. 显微镜物镜的放大倍数可由外形来辨别,镜头长度越短,口径越大,放大倍数越低。物镜的放大倍数都标在镜头上,常用的低倍镜为_ ×、20×;高倍镜为 ×、45×;油镜为90×、 ×。若20×的目镜与45×的物镜配合使用,显微镜的总放大倍数为900倍,一般用 表示。 2. 新玻璃器皿含有游离碱,一般先将其浸于 溶液中浸泡数小时,然后用自来水清洗干净;用过的培养皿或试管若含有废弃培养基或菌体,需先经高压蒸气灭菌或 后,倒掉污物,方可清洗。 3. 微生物培养基的分类方法和种类很多,如按培养基中凝固剂含量的多少可 分为 、 和 培养基;按照培养基的原料来源可分为 、 和 培养基,如PDA培养基根据其原料来源属于其中的 培养基。 4. 固体培养基的配制过程可简单描述为:配料(称量)→ →校正pH→加凝固剂→ →分装→加棉塞、包扎→ → ,其中最后一步非常关键,可检测培养基的是否可用。 5.培养基的灭菌一般多采用高压蒸气灭菌,灭菌压力为0.1Mpa,即 ℃,时间为20min,若培养基中含糖成分的含量较高,一般多采用过滤除菌或减压灭菌,灭菌温度为 ℃。 6.对不同的微生物进行斜面接种时,常根据需要采用不同的接种方法,如细菌和放线菌多采用 ,酵母菌多采用 法,用来观察第 7 页 (共 15 页)
年级:05级 专业:生物技术(本科) 课程号:04210207
菌种的形态和培养特征;霉菌多用 法。
7.利用显微镜观察不同的微生物常采用不同的制片方法,如细菌需经过固定和染色后利用 镜(物镜)观察;酵母菌需制备 片,不需要染色,高倍镜下观察;霉菌制片时需要 作为一种介质,防止菌丝成团影响观察;另外,在观察假丝酵母和青霉菌时,需作 以便观察到完整的菌体形态。
8.微生物学中可根据细菌的生理生化实验结果对未知菌进行鉴定,如利用MR实验和V-P实验可检测微生物 能力;明胶液化实验可检测细菌是否产 酶;硝酸盐还原实验可检测细菌是否具有硝酸盐还原酶,可将硝酸盐还原为 ,有些细菌还可继续还原,最后生成 和 。
9. 三糖铁高层琼脂斜面中含有的糖主要有葡萄糖、乳糖和蔗糖三种,培养基中加入了指示剂酚红, 它在pH小于6.8时为黄色, 大于8.4时为红色。伤寒沙门氏菌在该培养基里生长时,只能利用 产酸,产酸量也小。处于高层琼脂斜面表面的有机酸有的挥发,有的被氧化,很快消失。因此,表面黄色在短时间内也消失了。又因伤寒沙门氏菌分解氨基酸等产生 物质,所以高层琼脂斜面表面又转成 。而底层在比较短的培养时间为 色。而大肠杆菌在该培养基中生长时,能利用其中所有的糖,培养基上下全为 色。
10. 根据下表实验结果计算菌落总平均数。 例次 10-2 1 2 3 4 5 6 7
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不同稀释度的平均菌落数 10-3 56 280 286 1608 11 302 0 10-4 21 35 90 450 6 16 0 菌落总平均数及报告方两个稀释度 式(个/g, 或个/mL,) 菌落数之比 ——— ——— ——— ——— ——— 1200 多不可计 多不可计 3200 25 多不可计 0 2007 - 2008 学年第 一 学期本科试卷
课程名称:工业微生物学实验(A) ―――――――――――――装――――――――――――订――――――――――――线―――――――――――――― 11.实验过程中我们通常采用一些特殊的方法或添加一些特殊的物质来达到预期的目的,如移液管包扎时在粗头塞上一小段棉花的主要目的是 ;接种时采用穿刺法是便于观察细菌的 和对氧的需求情况;;糖发酵实验中加杜氏管的目的是便于观察 现象;乳糖胆盐发酵培养基(大肠菌群测定)中加入胆盐的目的是 ;将无菌的液体石蜡灌入斜面培养基进行菌种保藏时,液体石蜡的作用为 。 得分 1.显微镜的油镜使用完毕后,直接用擦镜纸揩去香柏油就可以了。 ( ) 2.利用手提式灭菌锅进行高压蒸汽灭菌时,首先应开启放汽阀,待锅内水沸腾后,使锅内的冷空气从放汽阀排净,此段时间大概为3~5min。 ( ) 学 院: 专 业: 学号: 姓名: 二、判断题(共10分,每小题1分) 3.最常用的划线接种法为三区划线,实际操作如图所示。利用该方法在第三区可获得单菌落。 ( ) 4.大肠杆菌和八叠球菌为革兰氏阴性菌,革兰氏染色后菌体呈红色;枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性菌,革兰氏染色后菌体呈紫色。 ( ) 5.在酵母细胞大小测定的实验中使用了目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微 尺需进行标定,即测定目镜测微尺每格代表的实际长度,当使用不同放大倍数的第 7 页 (共 15 页)
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物镜时该标定结果是相同的,不需要重新标定。 ( )
6.曲霉和青霉在个体形态上具有比较明显的差别,其中之一为曲霉具有足细胞,而青霉没有。 ( )
7.利用细菌总数测定方法所测得的是一群在营养琼脂生长的需氧或兼性厌氧
的杂菌总数。 ( ) 8.酵母死亡率测定实验中使用的无毒的染料为溴甲酚紫。 ( ) 9.简单染色或革兰氏染色中在载玻片上所涂的菌量越多越便于观察。 ( ) 10.培养基的pH值在加热灭菌后会上升0.3~0.4,因此配制时的pH值要比要求的略低一些。 ( )
1.大肠菌群
2.显微镜分辨力
3.无菌操作
4.假菌丝
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得分 三、名词解释(共12 分,每小题3分)
―――― ― ― ― ― ― :名―姓― ― ― ― 线 ― ― ― ― ―:号―学― ― ― ― ― ― 订 ― ― ― ― ― :业―― 专― ― ― ― ― 装 ― ― ― ― ― :院― ―学――――― ―2007 - 2008 学年第 一 学期本科试卷
课程名称:工业微生物学实验(A) 得分 四、简答题(共30 分) 1.革兰氏染色的原理?(5分) 2. 酵母菌死亡率测定的原理是什么?(5分) 3. 简单描述利用血球计数板测定酵母浓度的步骤及注意事项。(6分)
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