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大学生研究训练(SRT)计划项目申请书(幅面,16K) - 图文

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项目类别C 项目批准号

山东农业大学

大学生研究训练(SRT)计划

项目申请书

项目名称:小麦磷高效基因TaPHR1的遗传转化研究及转基因后代鉴定

申 请 人: 许艳艳 学号: 20082767

E—mail: xuyan20081011@163.com 所在学院: 农学院

专业年级: 08 级 农学 专业 一 班

联系电话: 15853870923

指导教师: 王洪刚 职称 教授

申报日期: 二○○九 年 月 日

山东农业大学

大学生研究训练(SRT)计划项目管理委员会

填 表 说 明

一、 填写立项申请书前,请先咨询指导教师或有关专业教师。申请书的各项内容要求实事求是,逐条认真填写。表达明确、严谨,一律要求用打印稿件。

二 、申请书为16K本,于左侧装订成册。一式三份(至少一份原件),由指导教师签署意见并经评审小组评审,学院审核后,报送SRT计划项目管理委员会。

三 、“项目类别”指A、B、C、D:A—学术论文、社会调查类;B—全国、省级竞赛(决赛)类;C—实验设计和科技制作、科研类;D—其他类。“项目批准号”不填,由学校统一编号。

四、“所在单位意见”一栏中,应注明研究人员、时间、条件、政策等方面的保证措施和意见。

五、如表格不够,可以加附页。

一、简表

项 目 简 况 项目名称 项目类别 申请经费 姓 名 小麦磷高效基因TaPHR1的遗传转化研究及转基因后代鉴定 A、学术论文、社会调查类; B、全国、省级竞赛(决赛)类; C、科学实验和科技制作、科研类; D、其他类。 3000元 许艳艳 起止年月 女 ?(最晚2011.3) 1989.10 学号 20082767 性别 学 院 兴趣爱好 电 话 职 称 授课名称 细胞遗传学 植物遗传改良的理论与方法 遗传学 细胞遗传学 分子细胞遗传学 教授 授课对象 研究生 研究生 本科生 研究生 博士生 项目名称 出生年月 农学院 项 专业、年级、目 班级 申 前一学期平请 均学分绩点 人 前一学期综合测评名次 姓 名 08级农学1班 3.65 第一名 王洪刚 时 间 2009 2009 2008 短跑、书法、旅游、看书 15853870923 研究方向 学 时 40 40 74 40 60 ? 授课单位 农学院 农学院 农学院 农学院 农学院 获奖情况 主要教学 工作简历 指 导 教 师 2008 2000-2005 时 间 1991-1997 主要科学研究工作简历 1998-2001 2001-2003 2003-2009 偃麦草多种双体附加小麦新种质创山东科技进步二等奖 新 利用小麦异附加系培育小麦新品系 山东科技进步二等奖 小麦综合抗病新种质的创新研究 山东科技进步三等奖 小麦抗病基因的分子标记及标记辅助育种 所在学习 项目中的 学院 状况 分工 农学优秀 院 签 字 主 姓 名 学 号 要 成 员 项 ∧ 李震震 20082683 目 不 组 含 申 请 者 王欣 20082717 ∨ 性 出生年月 别 专业 年级 08级 农学 男 1990.04 试验 李震震 女 1989.07 08级农学 农学优秀 院 试验 王欣 张超 20082750 男 1989.05 08级农学 农学优秀 院 试验 张超 二、立项依据(项目的意义、现状分析) 小麦是世界上种植面积最广的粮食作物,也是我国最重要的粮食作物之一,其产量的高低和品质的好坏影响到我国国民经济发展水平的高低。因而,小麦品质的遗传改良一直受到广泛的重视。由于传统的育种方式难以满足现代社会中人们对小麦产量和品质的需求,因此采用基因工程技术将控制优良性状的基因导入小麦品种,是近年来发展起来的新的品种改良方法。经过十多年的研究与探索,多种外源基因转化技术在小麦上应用并获得了成功,在提高小麦抗病虫害能力、抗逆性、改善品质和雄性不育利用等方面展现出了良好的应用前景。 转基因技术是指用人工方法将外源基因或DNA导入受体生物细胞中,稳定地整合、表达并遗传的技术。自从1992年Vasil等利用基因枪法获得第一例转基因小麦以来,各国研究人员利用多种遗传转化技术体系,将不同目的基因导入小麦,得到了转基因植株。而随着人们对农杆菌转化系统认识的深入及农杆菌介导技术在小麦遗传转化上优势的凸现,农杆菌介导法已逐渐开始取代基因枪法,成为人们进行小麦转基因研究的主要方法。 磷是植物正常生长发育必需的营养元素,它不仅是植物体内核酸、核蛋白、磷脂等多种重要化合物的组分,而且以多种方式参与植物体内的生理过程,在碳水化合物、氮素、 脂肪代谢,细胞的能量转换、呼吸和光合等代谢活动中都具有重要作用。充足的磷营养促进植物的生长发育,提高植物抵御旱、寒和盐碱等胁迫的能力。小麦是我国重要的粮食作物之一,而大多数小麦品种对磷肥的利用率仅为6%-26%。我国冬小麦主产区大多分布在缺磷的石灰性土壤上,土壤中有效磷含量远低于小麦正常生长的需求,这已成为小麦生产的主要限制因素之一。因此,进行小麦磷高效基因遗传转化方面的研究,对于提高小麦对土壤磷和磷肥的利用效率具有十分重要的意义。 三、项目实施方案及实施计划 实施方案、实施办法、具体实施计划及可行性分析。 实施方案: 1、小麦最优组织培养条件的研究:以MB培养基为基本培养基,研究不同浓度的2,4-D、KT、IAA及NAA对小麦再生体系的影响。 2、农杆菌介导小麦遗传转化体系的建立:对影响转化效率的因素,如农杆菌浓度及浸染时间等进行研究,以提高农杆菌转化小麦的效率。 3、转基因植株的获得:在研究并建立遗传转化体系的基础上,将磷高效基因TaPHR1转入小麦体内,获得转基因植株。 4、转基因小麦植株后代的PCR鉴定。 实施办法: 1、组织培养:小麦成熟胚诱导产生胚性愈伤组织。 2、农杆菌侵染:用农杆菌菌液浸染小麦愈伤组织,以找出最佳的菌液浸染浓度和时间,然后共培养3天。 3、获得植株:洗菌后加入抗生素筛选,然后分化成苗。 4、转基因植株的检测:提取基因组DNA进行PCR检测。 附:各培养基的配制 1.基本培养基 基本培养基 MB0 是由 MS 培养基的无机成分加上 B5 的有机物质,其组成成分及浓度、贮备液浓缩倍数、贮备液中各组分浓度(表 1)。 表 1 MB0 基本培养基及贮备液成分 母液中各成浓缩 实际各物质母液体实取体 成 分 分含量倍数 用量(g) 积(ml) 积(ml) (mg/L) KNO3 1,900 19 NH4NH3 1650 16,5 MgSO4·7H2O 370 3,7 大量元素 ×10 1000 100 KH2PO4 170 1.7 CaCl2·2H2O 440 4,4 ( or CaCl2 ) (332) (3,32) Na2SO4·4H2O 22.3 1.115 ( or Na2SO4·H2O) 16.9 0.845 ZnSO4·7H2O 8.6 0.43 H3BO4 6.2 0.31 微量元素 ×100 500 10 KI 0.83 0.0415 Na2MO4·2H2O 0.25 0.0125 CuSO4·5H2O 0.025 0.00125 CoCl2·6H2O 0.025 0.00125 Na2-EDTA 37.3 1.865 铁盐 ×100 500 10 FeSO4·7H2O 27.8 1.39 烟酸 1.0 0.02 肌醇 100 2 有机物质 ×200 100 5 VB1 10 0.2 VB6 1.0 0.02 2.诱愈培养基 -1 -1 -1 MB0 + 水解酪蛋白 500 mg·L+ 谷氨酰胺 200 mg·L+ 天门冬酰胺 150 mg·L+ 2,4-D

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