鸡β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性测定

鸡β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性测定

作者：刘新文;王秀丽;郭东春;郭伟伟;邹敏;范根成

作者机构：青岛易邦生物工程有限公司,青岛266032;青岛易邦生物工程有限公司,青岛266032;哈尔滨兽医研究所,哈尔滨150069;青岛易邦生物工程有限公司,青岛266032;青岛易邦生物工程有限公司,青岛266032;青岛易邦生物工程有限公司,青岛266032 来源：中国畜牧兽医 ISSN：1671-7236 年：2017 卷：044 期：007

页码：2203-2208 页数：6

中图分类：TQ929+.1 正文语种：chi

关键词：鸡β干扰素;分泌表达;抗病毒活性

摘要：为研究鸡β干扰素(chicken interferon-β,ChIFNβ)蛋白在毕赤酵母中的表达及其抗病毒活性,将克隆的ChIFNβ基因亚克隆至酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组质粒pPIC-ChIFNβ.将鉴定正确的质粒pPIC-ChIFNβ线性化,通过电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中,得到阳性菌株.经1.0%甲醇连续诱导4 d,表达产物利用SDS-PAGE电泳、细胞病变抑制法等进行分析.ChIFNβ在酵母中获得了分泌型表达,表达产物分子质量约为17 ku.表达产物以细胞病变抑制法检测其活性,效价为107.5 U/mL;在鸡胚中能有效抑制禽流感病毒H9N2的增殖.动物攻毒保护试验结果显示,表达的蛋白可提供70%的免疫保护.表达的ChIFNβ蛋白具有较好的抗病毒活性,本研究可为ChIFNβ的应用提供重要参考.