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探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用——改进创新设计
一、实验原理
淀粉和蔗糖都是非还原糖。它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖。还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应,再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原糖,就可以看出淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 证明酶的专一性。 二、目的要求
1.初步学会探索酶催化特定化学反应的方法; 2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 三、材料用具
研钵,试管,大烧杯,量筒,移液管,洗耳球,胶头滴管,温度计,解剖刀,解剖针,试管夹,三脚架,石棉网,酒精灯,火柴,水浴锅。冰糖,土豆,淀粉,多酶片,斐林试剂,热水等。 四、实验步骤
1、收集唾液后,取lml注入小烧杯中,加入2mL蒸馏水。振荡小烧杯使之混合均匀,制成稀释的唾液,即淀粉酶溶液①; 【改进:实验材料由书上所说化学试剂店出售的淀粉酶改为使用自己的唾液稀释液,因为唾液中含有唾液淀粉酶且取材方便,所以选择使用唾液淀粉酶溶液】
2、取2-3粒多酶片,用刀片切成两半,再用针挑出多酶片内的酶粉于小烧杯中,加入20mL蒸馏水后用玻璃棒搅拌均匀,配成淀粉酶溶液②;
【改进:把化学药剂店出售的淀粉酶改为一般药店都能买到的多酶片,因为多酶片内部主要成分有胰淀粉酶,且多酶片价格便宜取用也方便】
3、把冰糖外层被氧化还原了的部分用水洗去后,称取3g研细放入100ml热水中配成蔗糖溶液;
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【注意:冰糖外层可能被氧化成还原糖,干扰实验结果,所以使用前一定要冲洗去冰糖的表层杂质】 4、称取15g土豆剪成小块,研磨后将液体过滤到小烧杯中并加入热水配成100ml淀粉液①;
【改进:把书上所说化学试剂店出售的淀粉改为使用土豆现制淀粉液,因为土豆淀粉含量高且更好买到】
【注意:土豆在空气中易氧化变黑,淀粉变性或生成其他物质,影响实验结果,所以配置淀粉液时应迅速研磨和过滤,且现配现用】 5、称取3g淀粉,先用少量蒸馏水调匀,再加入热水配成100ml淀粉液②;
【改进:普通淀粉购买方便且普通淀粉也是可溶的】
【注意:淀粉不溶于冷水,但开水会破坏淀粉结构,所以用淀粉制淀粉液时,先用少量蒸馏水混合成悬浊液,再加入热水配制成淀粉溶液,可保证淀粉绝大部分溶解】
6、取8只洁净的试管,编上号,然后按下面要求进行操作:
A:淀粉液① 2ml+淀粉酶溶液① 2ml B:淀粉液① 2ml+淀粉酶溶液② 2ml C:淀粉液② 2ml+淀粉酶溶液① 2ml D:淀粉液② 2ml+淀粉酶溶液② 2ml E:蔗糖溶液 2ml+淀粉酶溶液① 2ml F:蔗糖溶液 2ml+淀粉酶溶液② 2ml G:淀粉液① 2ml+蒸馏水 2ml H:淀粉液② 2ml+蒸馏水 2ml;
【改进:增设了G、H对照组,以证明淀粉确实是为淀粉酶所分解】 7、轻轻振荡几只试管,使试管的液体混合均匀,然后将试管的下半部浸到37℃左右的热水中,保温10min;
【改进:书上所说60℃是针对化学试剂店的α-淀粉酶所言,但是我们所取的两种淀粉酶溶液中淀粉酶最适温度均为37℃左右。保温时间延长到10min则是为了使反应充分】
8、将斐林试剂甲液和乙液混合均匀后,取出试管,各加入2mL斐林试剂(边加斐林试剂边轻轻振荡这些试管,以便使试管内的物质混合均匀);
【注意:斐林试剂应提前将甲液和乙液混合均匀,切勿分别加入!】 9、将试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热煮沸1min。 五、预期结果
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A、B、C、D号试管内溶液变为砖红色(上图左侧试管),E、F、G、H号不变色(上图右侧试管) 六、指导方法与指导流程 基本原理讲解指导
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基本步骤演示和指导(集中指导)
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强调实验中的安全注意事项
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学生自主实验(此时教师在实验室内巡回指导,及时发现并纠正学生的操作问题,并对学生的疑问进行单独指导)
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进行实验结果分析和实验总结
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