RP-HPLC法测定氧氟沙星栓中氧氟沙星的含量
李文仕(广西百色食品药品检验所，广西 百色 533000)
【摘 要】摘要：目的 建立反相高效液相色谱法测定氧氟沙星栓中氧氟沙星的含量。方法 采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.05 mol·L-1枸橼酸溶液(三乙胺调节pH4.0)(15∶85)；检测波长为293 nm。结果 氧氟沙星质量浓度在20.02～400.3 μg·mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 7)，平均加样回收率为99.3％(n=9)，RSD为0.6％。结论 该方法简便快速，结果准确，可作为该制剂含量测定的方法。 【期刊名称】西北药学杂志 【年(卷),期】2011(026)006 【总页数】2
【关键词】氧氟沙星；氧氟沙星栓；反相高效液相色谱法
氧氟沙星(ofloxacin，OFLX)又名氟嗪酸，是由日本第一制药株式会社和群马大学经过20余年共同研究开发的第3代合成喹诺酮类广谱抗菌药物，不仅对G+和G-菌有良好的抗菌活性，且对部分厌氧菌、军团病菌属、支原体等也有良好的抗菌作用，尤其与抗生素无交叉耐药性，对耐青霉素、林可霉素、庆大霉素等的菌株仍有抗菌作用。经过多年的临床研究[1]证明，氧氟沙星对由各种细菌引起的全身性的、局部皮肤黏膜等感染显示了优良的效果，且不良反应小。氧氟沙星对由铜绿假单胞菌、革兰阳性菌和阴性菌等引起的妇科感染疗效显著[2]。 氧氟沙星栓是一种水溶性基质制成的栓剂，可避免全身用药引起的胃肠道反应和首过效应，主要用于治疗细菌性阴道炎。氧氟沙星栓在中、美、英、日四国药典中均未收载[3]，现行标准卫生部标准(试行)WS-139(X-113)-94收载的含
量测定方法为紫外分光光度法。虽然仍有报道[4-6]采用紫外分光光度法来控制氧氟沙星栓等相关氧氟沙星制剂的质量，但该法专属性较差，不能排除杂质的干扰。也有极个别报道，采用一阶导数光谱法[7]。多数改用高效液相色谱法进行含量测定[8-10]，可提高方法的专属性和结果的准确性。
1 仪器与试药
1.1 仪器 日本岛津公司LC-20A高效液相色谱仪(SPD-M10A二极管阵列检测器，岛津LC-Solution色谱工作站)；GR-202电子天平；SGSY4-II数显恒温水浴锅；超声波清洗器(功率100 W，频率50 Hz)。
1.2 试药 氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号130454-200604)；氧氟沙星栓(批号080310，080312，080315，江西吉安三力制药有限公司)；缺氧氟沙星的阴性对照样品(自制)；乙腈、三乙胺为色谱纯；水为高纯水；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 岛津 VP-ODS C18 柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.05 mol·L-1枸橼酸溶液(三乙胺调节pH4.0)(15∶85)；检测波长为293 nm；柱温为室温；进样量为10 μL。在上述色谱条件下，所测成分氧氟沙星峰形良好，与溶剂峰完全分离；经阴性对照实验表明，阴性对照无干扰，证明此条件可行。见图1。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取氧氟沙星对照品适量，用0.1 mol·L-1盐酸溶液溶解并稀释成含氧氟沙星约100 μg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取本品10粒，切细混匀，精密称取适量，加入少量的0.1 mol·L-1盐酸溶液温热(80 ℃水浴)搅拌使溶解，冷却至常温。再加0.1
mol·L-1盐酸溶液稀释成含氧氟沙星约100 μg·mL-1的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.4 阴性对照溶液的制备 取不含氧氟沙星的空白基质10粒，切细混匀，精密称取适量，加入少量的0.1 mol·L-1盐酸溶液温热(80 ℃水浴)搅拌使溶解，冷却至常温。再加 0.1 mol·L-1盐酸溶液稀释成相同倍数的溶液，滤过，取续滤液作为阴性对照溶液。
2.5 线性关系考察 精密称取氧氟沙星对照品50.04 mg，置100 mL量瓶中，加0.1 mol·L-1盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，备用。分别精密吸取以上对照品溶液1，3，5，10，15和20 mL，分别置25 mL量瓶中，再加0.1 mol·L-1盐酸溶液至刻度，摇匀，进样测定。以对照品溶液质量浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：Y=6.384 6×104X+2.009 4×104(r=0.999 7)。结果表明，氧氟沙星质量浓度在20.02～400.3 μg·mL-1范围内，与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度实验 取对照品溶液重复进样5次，每次10 μL，结果氧氟沙星峰面积RSD为0.6％(n=5)，符合精密度实验要求。
2.7 稳定性实验 取同一供试品溶液(批号080310)，分别在0，2，4，6，8，10和12 h测定峰面积，结果氧氟沙星各峰面积RSD为1.4％(n =7)，表明被测物在12 h内稳定。
2.8 重复性实验 取同一批供试品(批号080310)，按正文拟定的方法平行测定6份，结果氧氟沙星含量的平均值为98.5％，RSD为0.5％(n =6)，结果表明，本方法的重复性较好。
2.9 回收率实验 精密称取空白基质0.08 g，9份，分别置于100 mL量瓶中，
RP-HPLC法测定氧氟沙星栓中氧氟沙星的含量
