早期督脉电针干预对慢性脑缺血大鼠MDA、SOD的影响
刘 丹，张子凡，徐海燕
【摘 要】摘要：目的 探讨早期督脉电针干预对慢性脑缺血大鼠模型丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法 采用分次双侧永久性颈总动脉阻塞（2VO）制备慢性脑缺血大鼠模型，并随机分为4组，观察不同组别大鼠模型脑组织中MDA、SOD的变化。结果 与正常组比较，模型组MDA明显升高，SOD明显降低（P＜0.05）；立即针刺组、针刺治疗组较模型组 MDA明显下降，SOD明显升高（P＜0.05）。且立即针刺组与针刺治疗组相比，MDA降低与SOD升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 督脉电针干预可以明显降低慢性脑缺血大鼠模型脑组织中MDA含量、升高SOD活性，其机制可能为有效清除自由基，降低脂质过氧化应激反应，从而保护慢性脑缺血的神经功能损伤。与缺血形成后针刺相比，早期督脉电针干预治疗起到更好的疗效。 【期刊名称】中西医结合心脑血管病杂志 【年(卷),期】2013(011)011 【总页数】2
【关键词】脑缺血；督脉；电针；丙二醛；超氧化物歧化酶
慢性脑缺血指各种原因导致大脑出现慢性的广泛的脑血流灌注不足，从而引起一系列脑循环功能障碍的慢性疾病，临床上以持久或进展性认知功能与神经功能障碍为主。有研究表明氧化应激损伤是引起慢性脑缺血损伤的重要病理机制之一［1］。本研究通过制备慢性脑缺血大鼠模型，并在早期与造模成功后予以督脉电针干预，以探讨督脉电针对慢性脑缺血大鼠脑组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。
1 材料与方法
1.1 主要仪器 生物医学显微镜（南京医学显微镜厂），MDFU50V型低温冰箱（日本三洋），微量加样器（上海求精生化试剂仪器有限公司），DGX-9143B-1电热鼓风干燥箱（上海福玛实验设备有限公司），MDA、SOD试剂盒（南京建成生物工程研究所），LD4-ZA型低速离心机（北京医用离心机厂），Kwd-808脉冲电疗仪。
1.2 实验动物与分组 选用健康雄性Wister大鼠60只，3月～4月龄，体质量（180±10）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。随机将大鼠分为正常组、模型组、立即针刺组、针刺治疗组，共4组，每组又分为术后1个月、2个月、3个月等3个亚组，每组各5只。
1.3 动物模型的制备 采用大鼠分次永久性双侧颈总动脉阻塞（2VO）法制备慢性脑缺血大鼠模型：大鼠术前12 h禁食，4 h禁水。用10%水合氯醛（0.3 m L／100 g～0.35 m L／100 g）腹腔注射麻醉，仰卧位固定，颈部去毛消毒后正中切开，钝性分离出一侧颈总动脉和迷走神经。用4号丝线双重结扎一侧颈总动脉，缝合，切口内注32×104 U／m L青霉素注射液0.2 m L预防感染。该侧结扎后间隔1周，第2次手术行另一侧结扎。手术过程中通过白炽灯照射使其肛温保持在37℃～38℃，以避免低温对脑缺血的保护作用。术后3周慢性脑缺血模型制备成功。
1.4 穴位的选择及操作 大鼠的取穴标准及针刺方法参照《实验针灸学》及《大鼠穴位图谱》，选取神庭穴、百会穴为一组（神庭穴接正极、百会穴接负极）；风府穴、大椎穴为一组（风府穴接正极、大椎穴接负极）。立即针刺组从首次造模开始即行督脉电针，接上电疗仪，采用持续脉冲电流，频率2 Hz，强度2 m
A，输出强度以头部出现轻微抖动为度，针刺时间30 min，以后每天同一时间针刺1次，直至取材前最后1次。针刺治疗组于造模成功3周开始督脉电针干预，每天1次，直至取材最后1次。正常组及模型组不予以干预。
1.5 标本的收集与处理 每组大鼠均于末次进针后4 h～6 h内，用10%水合氯醛腹腔麻醉，迅速断头取脑，取位于视交叉后4 mm处至小脑前的脑组织，迅速置于10%的中性甲醛中，恒温4℃。固定4 d～6 d后，经乙醇常规脱水，二甲苯透明，石蜡包埋备用。
1.6 MDA、SOD的检测 取脑组织，常温解冻，分析天平称重后按照1∶9（W／V）加入生理盐水，剪碎组织块，在水浴中匀浆，在低温离心机2 000 r／min中离心10 min，取上清液。严格按照试剂盒操作程序，分别采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸显色法测定MDA和SOD活性。
1.7 统计学处理 采用SPSS18.0软件进行统计处理，数据以均数±标准差±s）表示，多组比较采用多样本均数的方差分析，两组间差异用成组设计的两样本均数比较的t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
模型组中MDA的含量明显升高，SOD的活性明显降低（P＜0.05）；立即针刺组和针刺治疗组分别与模型组比较，均能明显降低MDA的含量，升高SOD活性（P＜0.05）；立即针刺组与针刺治疗组比较，降低MDA含量、升高SOD活性差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。
3 讨 论
3.1 督脉电针选穴 督脉是人体诸阳经脉之海，统帅整个人体经脉系统，并与脑、脊髓等关系密切。神庭穴为督脉上行之气之所聚之处，具有宁神醒脑等功用；
早期督脉电针干预对慢性脑缺血大鼠MDA、SOD的影响
