多重反转录聚合酶链式反应检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的研究

多重反转录聚合酶链式反应检测H5、H7和H9亚型禽流

感病毒的研究

张文慧;王伟利;郑聪;刘明;钱爱东

【期刊名称】《华南农业大学学报》 【年(卷),期】2009(030)003

【摘要】利用多重反转录聚合酶链式反应同时检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒.在GenBank中搜索H5、H7和H9亚型禽流感病毒(AIV)的血凝素基因序列,并利用DNAStar软件分析其相似性,利用Primer Premier 5.0软件设计3对分别针对AIV H5、H7和H9亚型的特异性引物.这3对引物所扩增的cDNA片段大小分别为427、228和830 bp.结果表明,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了同时检测H5、H7和H9亚型AIV的多重RT-PCR技术.该多重RT-PCR对H5、H7和H9亚型AIV能同时扩增出3条大小分别为427、228和830 bp的cDNA片段,与其他常见禽病病原的核酸不存在交叉反应.该多重RT-PCR对H5、H7和H9哑型AIV cDNA的最低检出量分别为10 Pg、1 ng和10 Pg.

【总页数】4页(95-98)

【关键词】多重反转录聚合酶链式反应;禽流感病毒;H5亚型;H7亚型;H9亚型 【作者】张文慧;王伟利;郑聪;刘明;钱爱东

【作者单位】吉林农业大学,生命科学学院,吉林,长春,130118;吉林出入境检验检疫局,吉林,长春,130062;吉林农业大学,生命科学学院,吉林,长春,130118;中国农业科学院,哈尔滨兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;吉林农业大学,生命科学学院,吉林,长春,130118