PCR引物流程设计详解

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3、 设置引物设计参数（因为在之前查找基因序列的时候获知，外显子区域分别为：1-200、201-248、249-425、426-618，又知在引物设计时引物位置最好跨越一个含子，PCR产物长度通常为100-150bp，故设定上游引物位置为201-248，下游引物位置为249-425，产物长度为100-150bp）

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4、确认条件后，显示搜索结果

4、 双击选中得分最高的引物查看引物情况

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（上图为上游引物情况，下图为下游引物情况）

5、 将设计的上下游引物复制出来，保存到文档中

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三、

使用oligo 6.0对设计的引物进行评价

1、 建立新文件，将从cnki上获得的cDNA复制进输入框，并点击accept接收

2、 接收后显示出该序列的相关信息

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