血细胞分析仪测定血小板计数影响因素分析
周 莉，陈军政
【摘 要】摘 要:目的 探讨在血细胞分析仪中血小板计数(PLT)的影响因素。方法 采用Ac.T 5diff血细胞分析仪和手工计数法，测定40例健康体检者的静脉血和末梢血的血小板数量。结果 用仪器法在不同时间测静脉血的血小板计数差异有统计学意义(P<0.01)，在不同温度环境下测血小板数有差异(P<0.05)。结论 EDTA-K2抗凝静脉血和末梢血都可检测血小板数量，但需要注意测定时间范围、环境温度是否混合均匀等问题。当血小板直方图异常时，应采取手工计数和推片观察来予以纠正。
【期刊名称】国际检验医学杂志 【年(卷),期】2013(034)014 【总页数】2
【关键词】关键词:血细胞分析仪； 血小板计数； 血小板直方图 ·检验仪器与试剂评价·
目前血细胞分析仪在各级医院广泛应用，具有检测简便、快速、重复性好、精度高的特点。但血细胞分析仪受自身检测原理的限制，其检测的结果受很多因素的影响，特别是血小板计数(PLT)是临床反映较多的问题，为此作者探讨了几种影响血小板计数结果的常见因素及纠正方法。
1 资料和方法
1.1 一般资料 本院体检中心健康体检者40例；男23例，女17例，年龄在0.5～80岁。
1.2 仪器与试剂 仪器Ac.T 5diff血细胞分析仪及配套试剂和质控品(美国
BECKMAN-COLUTE公司生产)；OLYMPUS显微镜(日本)；血细胞计数板(上海)。
1.3 方法 静脉抽血2 mL，用EDTA-K2抗凝管，末梢采血 120 μL用EDTA-K2(0.15 mg)抗凝。仪器法按仪器操作说明操作，手工计数法按WHO推荐[1]，手工每份计数3次取平均值。
1.4 统计学处理 所有结果均用±s表示，各组资料的比较采用t检验。
2 结 果
2.1 40份静脉血分别在即刻、10 min、1 h、2 h、4 h、8 h用仪器和手工两种方法测定，其结果见表1。
2.2 静脉血标本和末梢血标本用仪器在2 h内测定血小板数结果见表2。 2.3 对40份静脉血标本在日常工作温度和放置水浴37 ℃，10 min后再测血小板数，结果见表3。
3 讨 论
3.1 EDTA在抑制PLT的黏附和聚集的同时，会使PLT形态由双凹形态变为球形，体积再增大约20%，取完标本立即上机测试，血小板计数会偏低，如果放置10 min后，血小板计数便达到稳定，从表1可看出放置10 min至4 h内，其PLT结果无显著性差异，但随放置时间越长，血小板数逐渐减少，8 h后出现显著减少(P<0.01)。当工作气温低于25 ℃时，冷凝集引起的PLT分布不均，会出现显著性减少(P<0.05)，此时应水浴保温37 ℃充分混匀，必要时推片镜检。
3.2 血小板体积小、无色、易黏附，当血液自血管破损处流出时，血小板一经与破损的血管内皮细胞及组织成分接触，立即以极快的速度黏附于破损的血管
壁，而且采集的血标本还要与不光滑的抗凝管表面接触，此时PLT黏附在其内壁并发生聚集[2]。因此，无论用何种方法采血，所数得的血小板数，均较血中实际血小板数为低，末梢采血比静脉采血更低，本文实验结果表明(见表2)，静脉采血与末梢采血比较差异无统计学意义(P>0.05)，但末梢采血影响因素很多，如扎针的深浅，取血的快慢，及挤压手指混进组织液，这些都会影响PLT的结果，有条件的都应取静脉血作血细胞分析，对有些基层单位和小孩患者难以做到静脉抽血，必须要末梢采血时，应深扎3 mm左右，让血自然流出，确保结果的准确性。
3.3 采用EDTA-K2抗凝的标本，血小板的体积不稳定，血小板的体积随标本的保存时间和保存温度而变化。根据Ac.T 5diff仪器分析原理，通常血小板计数阈在2～25 fL，3～18 fL是血小板的准确计数阈，18～25 fL是血小板的漂移阈(可能有干扰)，只要血小板直方图分布在18 fL以内，血细胞分析仪所测的血小板结果与临床基本吻合。当血小板体积超过25 fL时，依照仪器计数的原理，使许多大血小板被当作小细胞而未计人血小板的计数范围，让血小板计数结果偏低。因此在出现血小板计数和直方图异常，以及小红细胞病症的标本时，应及时人工计数，并推片观察，是否有血小板聚集团块和“血小板卫星现象”。 3.4 血细胞分析仪，无论是阻抗法还是光散法，对于血小板数及形态正常的标本，结果一般比较可靠，但对于血小板明显减少或/和形态异常者，所得结果误差甚大，因在病理情况下，血中会出现一些大小近似血小板的所谓“非血小板颗粒”，如小红细胞、红细胞碎片、白细胞片、细菌和真菌以及免疫复合物等，会被当作血小板加以计数，从而使血小板数假性增多。目前已报道准确计数血小板的方法大体上有两类[3]：一类是免疫学方法，即用荧光标记的抗血小板抗
血细胞分析仪测定血小板计数影响因素分析
