利用PCR技术扩增目的基因表述题 利用PCR技术扩增目的基因表述题
1、PCR技术由谁发明的？ 穆里斯
2、PCR是一种什么技术？ 是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 3、PCR技术的目的是什么？ 通过指数式扩增获取大量的目的基因 4、PCR技术的原理是什么？扩增的基因形态如何？ DNA双链复制 两种形态：一是从生物体的DNA上剪切下来，一是逆转录得到的基因
5、PCR扩增目的基因的前提是什么？为什么？
要有一段已知目的基因的核苷酸序列 目的是根据这一序列合成引物 6、PCR技术为什么要有引物？引物的作用是什么？
DNA聚合酶只能从5端向3端延伸DNA链，且只能将单个脱氧核苷酸连接到已知的DNA片段上 作用：结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点 7、体内DNA复制和PCR技术的引物有什么不同？ 体内的引物是RNA，完成复制后要切除。
PCR技术的引物是DNA，完成复制后不用切除。
（体外不用RNA的原因是体外温度变化比较大，用RNA会变性）
8、PCR技术为什么要用两种不同的引物？且两种引物不能存在互补配对的序列，原因是什么？ 用两种引物才能确保DNA的两条链同时被扩增
避免引物自连，从而导致引物不能同模板DNA结合，最终使链式反应不能进一步进行 9、写出PCR扩增的过程？ ①变性（DNA双链解开）：
模板DNA加热至90-95℃，使H键断开，DNA成为单链后与引物结合 ②退火（也称复性，引物与DNA单链结合）：
温度降至55~60℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③延伸（新DNA单链延伸）：
DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于70-75℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链. 10、体内DNA复制和PCR技术的异同有哪些？
1）温度不同：体内温度一般恒定， PCR的温度高且有变化
2）酶不同：体内要DNA解旋酶、DNA聚合酶， PCR需要Taq酶（中文名称最好记下来） 3）引物不同：体内为RNA（身身合成）， PCR为DNA，且要两种不同的引物。 4）解旋方法不同：体内用解旋酶， PCR用温度使H键断裂 5）引物是否要去除：体内要，PCR不用 相同点：模板，原料，方向及配对原则相同 ---------------
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1、PCR技术中所用的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶有什么区别？ PCR技术中所用的DNA聚合酶可以耐高温
2、在DNA聚合酶的作用下，两条子链的延伸方向是什么？ 从子链的5端向3端延伸
3、PCR技术中的变性和延伸的实质分别是什么？ 变性：DNA双链解旋
延伸：以DNA单链为模板，按碱基互补配对原则合成子链的过程
4、PCR与人体内DNA复制相比有何特殊之处？（一般记住两点即可） PCR技术是离体条件，需要高温，酶要耐高温，引物不需切除
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利用PCR技术扩增目的基因表述题
5、PCR技术需要的条件有：
DNA模板，原料(四种脱氧核苷酸dATP,dTTP,dCTP,dGTP)，Taq酶，两种引物 另外还需要：液体环境，适宜的温度，一定的酸碱度（缓冲液含Mg2+） 6、PCR开始时加热到94℃的目的是什么？ 使DNA片段的氢键断裂
7、若要检测一个人是否感染了艾滋病毒病毒，你认为是否可以用到PCR技术？
可以，若感染了艾滋病毒，则血液中有HIV病毒，可以用PCR技术来扩增艾滋病毒的RNA 8、引物判断
9、引物的化学本质是什么？ 一小段单链DNA或者RNA
10、PCR技术是否需要加入ATP？
不需要额外单独加入ATP，因为dNTP水解后会产生 11、PCR复制的结果情况
（第一次复制）
① ② ③ ④
① （第二次复制）
⑤ ⑥
②
注意：1）①复制后得到③④，②复制后得到⑤⑥ 2）只有④的35和⑤的53这两段才是目的基因的片段 3）第二次复制后得到的四个片段都还不是基因X
（第三次复制）
③复制得到A（二个）
⑤复制得到B（二个）
④复制得到C（二个） ⑥复制得到D（二个）
注：1）复制三次后，只有C上和B下才是目的基因X，所以三次复制后只得到2个目的基因 2）如果进行第四次复制：（可以得到8个目的基因）
A下可得一个目的基因， B上得一个，B下得二个 C上得二个，C下得一个 D上得一个
3）从第三交复制结果可以看出，不是目的基因X的单链片段是8段（A上两条，A下一条，B上一条，C下一条，D
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利用PCR技术扩增目的基因表述题
上一条，D下二条）所以不管接下来复制多少次，都有8段单链不可能形成目的基因。
所以复制次数和目的基因X的关系式是： 目的基因的个数=2n-2n
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