10级药学班 邱施敏 16号
槐花米中芦丁的提取、分离和检识
一、 实验目的：
1、 以芸香甙为例学习黄酮甙类分成分的提取，及甙的水解方法。掌握煎煮法的操作及碱溶酸沉的基本原理。 2、 掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮甙、甙元和糖部分的鉴别方法。 二、 实验原理：
芦丁为黄酮苷，分子中有较多的酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又析出；芦丁易溶于热水，较难溶于冷水，故可用这两个原理进行提取。本实验的提取的关键，是准确调PH值，调节PH值时，要充分搅拌。由于硼砂酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，因此在用碱性溶液加提取芦丁时，往往加入少量硼砂(四硼酸钠，碱性)，以防止被氧化。甙类在酸性下会被水解成甙元和糖，酸水解较彻底，最终水解出各种单糖。
黄酮甙及甙元可与盐酸—镁粉、三氯化铝、醋酸镁等发生显色反应，其中与三氯化铝的反应产物具有荧光。莫立许反应则属于糖和甙的性质。
三、 实验内容： （一） 提取：
称取槐花米（压碎）20克于大烧杯中，加0.2%硼砂水溶液200ml，加热煮沸20分钟（注意补充水分和保持pH值），用玻璃棉花过滤，药渣再用上述溶剂200ml按上述步骤提取一次，合并两次滤液，放冷，加浓盐酸调pH=2-3，
冰水浴半小时，等析出大量结晶后(注不能搅拌)，抽滤，最后用蒸馏水边抽边洗涤结晶即可得芸香甙粗制品。 （二） 水解;
取精制芸香甙一半，加2%硫酸水溶液80ml，小火加热，微沸加热回流，并及时补充蒸发的水分。在加热过程中，开始时溶液呈浑浊状态（约需十分钟左右），溶液由浑浊转为澄清，继续加热，逐渐析出黄色小针状结晶，即水解产物槲皮素，继续加热至结晶物不再增加为止。放冷，冰水浴，抽滤（取滤液20ml，直火浓缩至5ml，保留，以备后面检识滤液中的单糖），得槲皮素结晶。减压70度干燥，可得槲皮素无水物。
（三） 芸香甙、槲皮素及糖的检识： 1. α-萘酚-浓硫酸试验
取芸香甙少许于试管中，加乙醇1ml振摇溶解，加α-萘酚试剂2-3滴振摇，倾斜试管，沿管壁徐徐加入1ml浓硫酸，
静置，观察二层溶液界面变化。 2、盐酸-镁粉试验
取芸香甙少许于试管中，加50%乙醇2ml，在水浴中加热溶解，滴加浓盐酸2滴，再加镁粉（50mg）观察现象。 3、 三氯化铝试验
取芸香甙少许于试管中，加入甲醇1-2ml，在水浴中加热溶解，加1%三氯化铝甲醇溶液2-3滴，观察现象。 4、 醋酸镁试验
取芸香甙少许于试管中，加入甲醇1-2ml，在水浴中加热溶解，加1%醋酸镁甲醇溶液2-3滴，观察现象。 四、 实验结果：
（一） 提取：得芸香甙粗制品 （二） 水解：得槲皮素无水物
（三） 检识：1.出现紫—棕色环
2.加入镁粉后即产生剧烈反应，溶液逐渐由黄色变红色 3.呈鲜黄色荧光反应 4.溶液呈黄色
槐花米中芦丁的提取
