Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其
意义
高文峰1， 王治平1， 许 竞1， 宋治锋2， 曾曙光1
【摘 要】【摘要】 目的 探讨Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达情况及其临床意义。方法 收集85例OSCC标本和15例正常口腔黏膜组织标本，应用免疫组化SP法检测在标本中Twist和Vimentin蛋白的表达水平，分析其与口腔鳞癌患者临床病理因素的相关性。结果 Twist蛋白在正常组织中的阳性率为13.3%（2/15），在OSCC组织的阳性率为80.0%（68/85），两组相比差异具有统计学意义（χ2＝26.98，P ＜ 0.001），同时其在OSCC中的表达与性别（χ2＝0.23，P＝0.63）、年龄（χ2＝ 0.31，P＝0.58）、部位（χ2＝1.46，P＝0.23）、组织学分化（χ2＝1.52，P＝0.47）等因素无关，与临床分期（χ2＝5.40，P＝0.02）、淋巴结转移（χ2＝8.35，P＝0.006）等因素有关；Vimentin蛋白在正常组中的阳性率为6.7%（1/15），在OSCC组中为74.1%（63/85），两组差异有统计学意义（χ2＝20.71，P ＜ 0.001），同时其表达与性别（χ2＝0.40，P＝0.53）、年龄（χ2＝0.17，P＝0.68）、部位（χ2＝0.74，P＝0.39）、组织学分化（χ2＝4.58，P＝0.10）等因素无关，与临床分期（χ2＝4.51，P＝0.034）、淋巴结转移（χ2＝6.75，P＝0.009）等因素有关。Spearman等级相关分析显示，Twist与Vimentin蛋白存在正相关（r＝0.578，P＜0.05）。结论 在OSCC中Twist和Vimentin蛋白表达增加，并且两者存在正相关关系，提示在OSCC中两者可能共同参与肿瘤的发生和发展。 【期刊名称】《口腔疾病防治》
【年(卷),期】2018(026)010 【总页数】5
【关键词】【关键词】 口腔鳞癌； Twist蛋白； Vimentin蛋白； 上皮间质转化； 免疫组化
【引用著录格式】 高文峰，王治平，许竞，等.Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义[J].口腔疾病防治,2018,26(10):639?643. 【修回日期】2018?07?03
【基金项目】广东省医学科学技术研究基金项目（A2015215）
口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤，具有恶性程度高、易早期转移和预后较差等特点，其侵袭与转移能力强是影响OSCC患者预后的其中一个重要因素，早期发现和治疗是提高其预后的重要手段。上皮间质转化（epithelial?mesenchymal transi?tion，EMT）是肿瘤形成及侵袭转移中非常重要的过程。转录因子Twist是肿瘤转移的重要调控基因之一，在多种肿瘤组织中高表达，并具有调控EMT的作用［1?4］，但在OSCC 中的作用尚未完全清楚。本研究旨在通过免疫组化技术检测在OSCC组织中Twist蛋白与EMT表型分子波形蛋白（vimentin）的表达情况，分析其与各因素的相关关系，探讨Twist蛋白在OSCC发生发展中所起的作用及其与EMT的关系。
1 资料和方法
1.1 标本来源
收集2010～2016年间南方医科大学口腔医院OSCC的活检标本（全部为临床初诊活检病例，患者术前均未采用化疗、放疗治疗）85例，并收集因外伤而切
除的正常口腔黏膜标本15例作为对照。所有患者均知情同意。OSCC组患者中男47例，女38例；年龄28～86岁，中位年龄为51岁。正常组中男8例，女7例，年龄18～46岁，中位年龄为31岁。OSCC病例按WHO诊断标准，由口腔病理医师确诊和分级，其中OSCCⅠ级25例，Ⅱ级33例，Ⅲ级27例。 1.2 主要试剂
一抗Twist兔抗人多克隆抗体浓缩型（Santa Cruz公司，美国），工作浓度1∶100；Vimentin鼠抗人单克隆抗体即用型、二抗链霉素抗生物素蛋白?过氧化物酶（streptavidin?peroxidase，SP）试剂盒和3，3?二氨基联苯胺（3，3?diamonobezidine，DAB）显色液（福州迈新生物技术公司，中国）。 1.3 实验方法
所有标本均经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋，4μm连续切片。常规脱蜡、脱水，微波热处理修复抗原，按SP法免疫组织化学染色试剂盒说明书步骤操作，DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。以PBS代替一抗作为空白对照。置于显微镜下观察染色情况。 1.4 免疫组织化学结果判定
显微镜下随机选择5个高倍视野（×400），采用半定量积分法判断结果［4］：首先计数阳性细胞所占的百分比，按阳性细胞百分率判定：阳性细胞比例＜10%为0分，11%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分；其次根据染色程度判定：不着色为0分，浅黄色为1分，深黄色为2分，棕褐色为3分。两者积分相乘，本研究中以积分≤3分定为阴性（-），＞3分定为阳性（+）。 1.5 统计学分析
Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义
