南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2019，50（11）：2539-254411期2095-1191；ISSNCODENNNXAABhttp://www.nfnyxb.com·2539·DOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2019.11.22不同油棕品种维生素E含量测定及其与粗脂肪
含量的相关性分析
周丽霞，曹红星*
（中国热带农业科学院椰子研究所/海南省热带油料作物生物学重点实验室，海南文昌
571339）
摘要：【目的】测定4个单株年产油量较高油棕品种果肉中的维生素E含量，明确其与粗脂肪含量的相关性，为棕榈油品质的改良提供参考依据。【方法】以4个油棕品种（XJS30、SD60、SJ64和LS30）的新鲜果为试验材料，参考国家标准GB/T2906—1982采用索氏提取法提取果肉粗脂肪，参考国家标准GB5009.82—2016提取果肉维生素E，应用高效液相色谱法测定其含量与组分，并结合测定的粗脂肪含量，通过线性回归（Y=aX+b，其中Y为维生素E含量，X为粗脂肪含量）分析二者间的相关性。【结果】利用高效液相色谱法检测维生素E含量的线性关系良好，精密度高，维生素E的平均回收率高达98.93%；4个油棕品种果肉中均含有α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚4种异构体，品种间的维生素E含量排序为SJ64（724.83mg/kg）>SD60（344.52mg/kg）>XJS30（215.46mg/kg）>LS30（159.13mg/kg），变异范围为23.64%~44.16%；测定120份油棕果肉粗脂肪含量，并通过线性回归分析其与维生素E含量间的线性关系，证实油棕维生素E含量与粗脂肪含量呈正相关。【结论】在年产油量较高的4个油棕品种中，SJ64品种的果肉维生素E含量及粗脂肪含量均最高，且二者间呈正相关，该研究结果为棕榈油品质改良及油棕新品种培育提供了参考。
关键词：油棕；维生素E；粗脂肪；高效液相色谱法；相关性分析中图分类号：S565.9
文献标志码：A
文章编号：2095-1191（2019）11-2539-06
CorrelationanalysisbetweencontentsofvitaminEandcrude
fatindifferentoilpalmvarieties
ZHOULi-xia，CAOHong-xing*
（CoconutResearchInstitute，ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScience/HainanProvincialKeyLaboratoryof
TropicalOilCropsBiology，Wenchang，Hainan571339，China）Abstract：【Objective】ThecontentofvitaminEandcrudefatinthefleshoffouroilpalmvarietiesweredetermined，
andthecorrelationbetweenthecontentofvitaminEandpalmcrudefatwasanalyzed，whichprovidedexperimentalbasisforimprovementofpalmoil.【Method】AccordingtothenationalstandardofGB/T2906—1982withfourvarieties（XJS30，SD60，SJ64andLS30）ofoilpalmasmaterials，thecrudefatinfreshfruitwasextractedbySoxhlerextractor，andaccordingtothenationalstandardGB5009.82—2016，thevitaminEwasextractedandanalyzedbyhighperformanceliquidchromatography.ThecorrelationbetweenthecontentsofvitaminEandpalmcrudefatwasanalyzedbylinearre-gression（Y=aX+b，whereYwasthecontentofvitaminEandXwasthecontentofpalmcrude）.【Result】Thecontentofvi-taminEanalyzedbyhighperformanceliquidchromatographyshowedgoodlinearrelationship，highprecisionandtheave-ragerecoveryrateofvitaminEwas98.93%.α-tocopherol，β-tocopherol，γ-tocopherolandδ-tocopherolwerealldetectedinfouroilpalmvarieties.ThecontentofvitaminEamongthefourvarietieswasSJ64（724.83mg/kg）>SD60（344.52mg/kg）>XJS30（215.46mg/kg）>LS30（159.13mg/kg），andthevariationofvitaminErangedfrom23.64%to44.16%.Fi-nally，thecontentofcrudefatin120oilpalmfleshwasdetermined，andthelinearrelationshipbetweenvitaminEcontentandcrudefatwasanalyzedbylinearregressionanalysis，andthepositivecorrelationbetweenvitaminEcontentandcrudefatcontentinoilpalmwasclarified.【Conclusion】Amongthefouroilpalmvarietieswithhighannualoilyield，SJ64hasthehighestcontentofvitaminEandcrudefat，andthereisapositivecorrelationbetweenthem.Theresultsofthisstudycanprovidereferenceforimprovingpalmoilqualityandcultivatingnewoilpalmvarieties.
Keywords：oilpalm；vitaminE；crudefat；highperformanceliquidchromatography；correlationanalysis收稿日期：2019-03-27
基金项目：农业农村部物种品种资源保护费项目（125163015000160004）；农业农村部农业技术试验示范与服务支持项目
（16RZNJ-5）；中国热带农业科学院基本科研业务费项目（1630152017008）
作者简介：*为通讯作者，曹红星（1977-），博士，研究员，主要从事热带油料作物育种及栽培研究工作，E-mail：411680755@qq.
com。周丽霞（1982-），主要从事热带油料作物遗传育种研究工作，E-mail：glzz_2009@163.com
·2540·南方农业学报50卷0引言
【研究意义】油棕（ElaeisguineensisJacq.）属棕榈科多年生自立乔木，其油棕果的油含量高达50%以上，一株油棕年产油量30~40kg，每公顷年产油量高达4~6t，因此享有“世界油王”的美誉（Sowmyaetal.，2019）。油棕起源于热带地区，其中马来西亚和印度尼西亚是世界公认的油棕种植区，也是全球最主要的棕榈油生产国，棕榈油作为主要的食用油对发展中国家人民的生活不可或缺。随着我国经济的快速发展和对植物油需求量的增大，价格低廉的棕榈油越来越受到青睐，其年消费量仅次于大豆油。据统计，我国每年进口约700t棕榈油，其中，25%用于烹饪，30%用于食品加工，20%用于方便面（熊惠波等，2009）。通过分析棕榈油成分发现，棕榈酸C16:0）和硬脂酸（C18:0）所占的比例最大（李瑞等，2011），说明棕榈油与其他植物油（大豆油、花生油）相比具有较高的饱和度，其饱和脂肪酸含量相对较高，不饱和脂肪酸含量相对较低，这一特性与人们追求健康饮食的理念相冲突。但棕榈油中含有丰富的维生素E，维生素E可极大提高棕榈油的抗氧化性，因此，测定棕榈油中维生素E含量，明确其与脂肪酸含量间的相关性，对棕榈油品质的改良具有重要意义。【前人研究进展】目前，国内已有不少学者研究食用油中维生素E含量及其与脂肪酸的相关性。王丽等（2006）利用高效液相色谱法测定大豆油中维生素E含量，并通过线性回归分析，明确了大豆油中维生素E与粗脂肪含量呈正相关的线性关系；彭光华等2008）通过高效液相色谱法结合荧光检测器测定了油菜籽中维生素E含量，实现了测定结果的重现性、准确度及精密度；董海胜和陈斌（2012）应用气相色谱分析茶树籽油和马齿苋籽油中维生素E含量及脂肪酸的组成与含量，发现两种油中棕榈酸和硬脂酸含量相似，亚麻酸含量差异明显，茶树籽油中的维生素E以α-生育酚为主，而马齿苋籽油以（β+γ）-生育酚为主；冯光燕等（2015）通过高效液相色谱法测定16个紫花苜蓿叶片中的维生素E含量，发现中苜1号、雷达克之星和新疆大叶苜蓿是高维生素E含量的品种；翦英红等（2016）建立了反相高效液相色谱—紫外法，可准确测定植物油样本中α-维生素E含量；温运启等（2017）应用高效液相色谱法测定9个油脂品种中的维生素E含量，发现不同食用植物油中维生素E组分和含量均存在明显差异。【本研究切入点】目前国内学者对棕榈油的研究报道较少，且主要是对脂
肪酸组分及含量的鉴定分析（张琳等，2011；周丽霞等，2019）。我国引种试种油棕已有近90年的历史，
收集保存了适合我国栽培的油棕种质，但针对年产油量较高的油棕品种间维生素E组分和含量比较，以及其与粗脂肪含量线性关系的研究鲜见报道。【拟解决的关键问题】通过测定4个单株年产油量较高油棕品种果肉粗脂肪含量及维生素E的组成与含量，明确二者间的相关性，从中选出高不饱和脂肪酸和高维生素E的油棕品种，为棕榈油品质改良及油棕育种提供参考。
1材料与方法
1.1
试验材料
供试的4个油棕品种（XJS30、SD60、SJ64和LS30）均来自中国热带农业科学院椰子研究所油棕品种试种示范园，每个品种选取30份饱满、大小均一的成熟果。石油醚（60~90℃）、氢氧化钾、甲醇、苯、二氯甲烷和生育酚标准品均购自海口琼山莱客（海南）科技服务中心。主要仪器设备：Agilent7890A气相色谱—质谱联用仪、Agilent1260高效液相色谱仪、上海熙扬索氏提取器和上海亚荣RE52旋转蒸发仪。
1.2试验方法
1.2.1粗脂肪提取粗脂肪的提取及定量参考GB/T2906—1982进行。
1.2.2维生素E提取参考GB5009.82—2016，称取约2g油棕果肉置于10mL离心管中，加入3mL二氯甲烷—甲醇（v/v=1∶9）和1mL50ng/μL生育酚标准品，摇匀，超声波萃取约20min后置于冰水中振荡5h，然后12000r/min离心15min，吸取约1mL上清液于高效液相色谱上样瓶中以备分析。1.2.3样品皂化参考王丽等（2006）的皂化方法，准确称量1.0000g粉碎后的油棕样品，置于50mL离心管中，加入10mL6%焦倍酚的乙醇溶液，充分摇匀后超声波提取约20min，然后分别加入2mL的60%氢氧化钾溶液和100μL的1mg/mL母育酚溶液，将其作为内标，最终样品检测液中的母育酚含量为10μg/mL。置于70℃水浴中恒温皂化30min后，置于冰水中冷却。
1.2.4高效液相色谱分析条件色谱柱为AgilentXDB-C18（4.6mm×150mm×5μm），流动相为甲醇—超纯水（v/v=95∶5），流速1.5mL/min，激发波长292nm，发射波长330nm，进样量1μL。
1.2.5标准溶液配制分别称取α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚标准品各50mg，以正己烷
（（11期周丽霞等：不同油棕品种维生素E含量测定及其与粗脂肪含量的相关性分析
·2541·为溶剂，定容至50mL容量瓶中，作为母液于-20℃保存备用。
1.2.6回收率检测精确称量已知α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚含量的油棕样品1.0000g为空白样本，分别加入100μL的15μg/mLα-生育酚、15μg/mLβ-生育酚、50μg/mLγ-生育酚和25μg/mLδ-生育酚标准液，按1.2.3进行皂化提取，平行检测9次，取其平均值。1.3统计分析
应用Agilent化学工作站提供的软件对高效液相图谱进行鉴定和定量分析，内标法计算粗脂肪含量，采用SPSS18.0进行相关性分析，Excel2010进行数据分析处理。
2结果与分析
2.1
线性关系考察结果为考察线性关系，将α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚配制成5种质量浓度的混合标准液（表1），重复测定3次混合标准液，取平均值。α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚及δ-生育酚的线性回归方程分别为Yα=3528.32Xα+156.03、Yβ=2760.11Xβ+80.27、Yγ=4963.75Xγ+164.38和Yδ=9831.62Xδ+69.31，其中，Y为生育酚峰面积，X为生育酚质量浓度（μg/mL），上述4
表2精密度试验结果（n=9）Table2Precisiontest（n=9）
生育酚Tocopherolαβγδ
个线性回归方程的回归系数分别为0.9992、0.9995、0.9993和0.9997，表明生育酚峰面积与质量浓度间的线性关系良好。
2.2精密度试验结果
检测3种质量浓度生育酚混合标准液9次，并检测4种油棕混合样品9次，以信噪比S/N=3计算，结果如表2所示，生育酚标准品和油棕样品中α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚及δ-生育酚的峰面积相对标准偏差（RSD）变化范围分别为0.49%~1.00%和0.62%~1.35%，且重复性良好。2.3回收率检测结果
样品回收率结果如表3所示，α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚的回收率为97.55%~101.20%，平均回收率为98.93%，满足本研究所需的条件。
表1混合标准液中α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚的质量浓度（μg/mL）
Table1Themassconcentrationofα-tocopherol，β-tocopherol，γ-tocopherolandδ-tocopherolinmixedstandardsolution（μg/mL）
生育酚Tocopherolαβγδ
10.100.120.700.40
混合标准液Mixedstandardsolution
23451.002.003.004.001.202.403.604.807.0014.0021.0028.004.008.0012.0016.00
标准品Standardsolution
平均峰面积标准偏差相对标准偏差（%）AverageareaofpeakSDRSD
161.340.740.8851.880.180.49294.041.381.00120.730.660.54油棕样品Oilpalmsample
平均峰面积标准偏差相对标准偏差（%）AverageareaofpeakSDRSD
157.760.921.3515.320.071.11134.291.840.6298.541.031.25
表3回收率试验结果（n=9）
Table3Recoverytest（n=9）
生育酚加入量（μg）测定值（μg）回收率（%）平均回收率（%）TocopherolAddedFoundRecoveryAveragerecoveryα1.000.9898.6098.93β1.001.01101.20γ2.001.9597.55δ2.001.9698.35
相色谱检测数据进行分析，结果如表4所示，不同品种间的果肉维生素E含量各不相同，其中，SJ64品种的果肉中维生素E含量最高，其平均含量达724.83mg/kg，其次为SD60品种（344.52mg/kg），LS30品种含量最低，为159.13mg/kg；4个品种间的维生素E变异范围为23.64%~44.16%。
表44个油棕品种果肉维生素E含量的变异分析结果
Table4VariationofvitaminEcontentinfouroilpalmvarie-ties
指标Index最小值（mg/kg）Min最大值（mg/kg）Max平均值（mg/kg）Mean变异系数（%）CV
SD60124.03661.34344.5223.64
XJS3098.65367.01215.4633.27
SJ64367.741092.53724.8344.16
LS3052.31269.22159.1326.82
2.4
油棕维生素E组分及含量测定结果
利用高效液相色谱法测定油棕样品及标准品，结果如图1所示，按出峰时间的先后顺序，4个品种油棕样品中维生素E的组分均依次为α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚，该结果表明棕榈油中含有维生素E的4种异构体。
对4个油棕品种的120份果肉维生素E的高效液
不同油棕品种维生素E含量测定及其与粗脂肪<p>含量的相关性分析</p><p><br/></p>
