GVPC添加剂 见G.4.1.1 BCYE添加剂 见G.4.1.2 蒸馏水 1000 mL
G.4.1.4制法：将活性碳、酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高压灭菌15 min，加入GVPC添加剂（G．4.1.1）和BCYE添加剂（G.4.1.2），分装于灭菌后的离心管（G.3.3）中备用。
G.4.2 采样吸收液2-酵母提取液 G.4.2.1 吸收液成分： 酵母浸出粉 12 g 蒸馏水 1 000 mL
G.4.2.2制法：将酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高压灭菌15 min，分装于灭菌后的离心管（G.3.3）中备用。 G.4.3 盐酸氯化钾溶液[c（HCI·KCI） =0. 01 mol/L] G.4.3.1成分：
盐酸（0.2 mol／L） 3.9 ml_, 氯化钾（0.2 mol/L） 20 mL
G.4.3.2制法：将上述成分混合，用1mol/L）氢氧化钠调整pH=2.2±0.2，121℃下高压灭菌15 min备用。 G.4.4 其他试剂 G.4.4.1 GVPC琼脂平板。 G.4.4.2 BCYE琼脂平板。
G.4.4.3 BCYE-CYE琼脂平板。 G.4.4.4 革兰氏染色液。 G.4.4.5 马尿酸盐生化反应管。 G.4.4.6 军团菌分型血清试剂。 G.5 采样
G.5.1 采样点：每套空调系统选择3个～5个送风口进行检测，每个风口设置1个测点，一般设在送风口下方15 cm～20 cm、水平方向向外50 cm～100 cm处。
G.5.2 将采样吸收液1（G.4.1）20 mL倒入微生物气溶胶采样器（G.3.2）中，然后用吸管加入矿物油1滴～2滴。 G.5.3 将微生物气溶胶浓缩器（G．3.1）与微生物气溶胶采样器（G.3.2）连接，按照微生物气溶胶浓缩器和微生物气溶胶采样器的流量要求调整主流量和浓缩流量。 G．5.4 按浓缩器和采样器说明书操作，每个气溶胶样品采集空气量1 m～2 m。
G.5.5 将采样吸收液2（G．4.2）20 mL倒入微生物气溶胶采样器（（G．3.2）中，然后用吸管加入矿物油1滴～2滴；在相同采样点重复G.5. 3-G..5.4步骤。
G.5.6 采集的样品不必冷冻，但要避光和防止受热，4 h内送实验室检验。 G.6 检验步骤
3
3
G.6.1 样品的酸处理：对采样后的吸收液1（G.4.1）和吸收液2（G.4.2）原液各取1 mL．分别加入盐酸氯化钾溶液（G.4.3）充分混合，调pH至2.2．静置15 min。 G.6.2 样品的接种：在酸处理后的2种样品（G.6.1）中分别加入1 mol/L氢氧化钾溶液，中和至pH为6.9，各取悬液0.2 mL～O.3 mL分别接种GVPC平板（G.4.4）。 G.6.3 样品的培养：将接种平板静置于浓度为5%、温度为35℃～37℃的CO2培养箱（G.3.5）中，孵育10 d。 G.6.4 菌落观察：从孵育第3天开始观察菌落。军团菌的菌落颜色多样，通常呈白色、灰色、蓝色或紫色，也能显深褐色、灰绿色、深红色；菌落整齐，表面光滑，呈典型毛玻璃状，在紫外灯下，部分菌落有荧光。
G.6.5 菌落验证：从平皿上挑取2个可疑菌落，接种BCYE琼脂平板（G．4.5）和L-半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板（G．4.6），35℃～37℃培养2d，凡在BCYE琼脂平板上生长而在L-半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板不生长的则为军团菌菌落。
G.6.6 菌型确定：应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养：氧化酶（-／弱+），硝酸盐还原（-），尿素酶（-），明胶液化（+）．水解马尿酸。血清学实验：用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。 G.7 结果报告
G.7.1 采样点测定结果：两种采样吸收液中至少有一种吸收液培养出嗜肺军团菌，即为该采样点嗜肺军团菌阳性。 G.7.2 一套系统测定结果：一套系统中任意一个采样点嗜肺军团菌检测阳性，即该空调系统送风中嗜肺军团菌的测定结果为阳性。
附录H（规范性附录）集中空调风管内表面积尘量检验方法 H.1 总则
本附录规定了用称重法测定集中空调系统风管内表面的积尘量。 H.2 原理
采集风管内表面规定面积的全部积尘，以称重方法得出风管内表面单位面积的积尘量，表示风管的污染程度。 H.3 设备和器材
H.3.1 定量采样机器人或手工擦拭采样规格板：采样机器人采样面积为50 cm或100 cm，采样精度为与标准方法的相对误差小于20%;采样规格板面积为50 cm或100 cm，面积误差小于5%。
H.3.2 采样材料：无纺布或其他不易失重的材料。 H.3.3 密封袋。
H.3.4 必要的采样工具。
H.3.5 分析天平，精度0.000 1g。 H.3.6 恒温箱。
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2
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H.3.7 干燥器。 H.4 采样
H.4.1 采样点数量：机器人采样每套空调系统至少选择3个采样点，手工擦拭采样每套空调系统至少选择6个采样点。 H.4.2 采样点布置：机器人采样在每套空调系统的风管中（如送风管、回风管、新风管）选择3个代表性采样断面，每个断面设置1个采样点。手工擦拭采样在每套空调系统的风管中选择2个代表性采样断面，每个断面在风管的上面、底面和侧面各设置1个采样点；如确实无法在风管中采样．可抽取该套系统全部送风口的3%～5%且不少于3个作为采样点。
H.4.3 风管开孔：在风管采样时将维修孔、清洁孔打开或现场开孔，在送风口采样时将风口拆下。
H.4.4 采样：使用定量采样机器人或手上法（H．3.1）在确定的位置、规定的而积内采集风管表面全部积尘，表面积尘较多时用刮拭法采样，积尘较少不适宜刮拭法时用擦拭法采样，并将积尘样品完好带出风管。 H.5 检验步骤
H.5.1 将采样材料（H.3.2）放在105℃恒温箱内（H.3.6）干燥2 h后放人干燥器（H.3.7）内冷却4 h，或直接放入干燥器中（H.3.7）存放24 h后，放入密封袋（H.3.3）用天平（H.3.5）称量出初重。
WS3942012公共场所集中空调通风系统卫生规范
