聚氯乙烯
聚氯乙烯与聚苯乙烯是类似的塑料，也可作
为ELISA固相载体，聚氯乙烯板的特点为质软板薄，可切割，价廉、但光洁度不如聚苯
乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚
苯乙烯高，但空白值有时也略高。
UV分析板(紫外光分析板)
聚苯乙烯和聚氯乙烯板在紫外区有很强的吸收不能
用于蛋白核酸的定量。
nnn
Uv分析板可直接读取核酸及蛋白的浓度在260nm/280nm低本底干扰
UV板价格昂贵一般在150RMB左右
抗原和抗体
抗原和抗体的质量是实验是否成功的关键因素。本法要求所
用抗原纯度高，抗体效价高、亲和力强。
n
天然抗原（天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物
等，一般含有多种抗原成分，需经纯化，提取出特定的抗原成分后才可应用，因此也称提纯抗原（purifiedantigen）。）
nn
重组抗原合成多肽抗原
（重组抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均为人工合成品，使用安全，而且纯度高，干扰物质少。）
抗体
nn
多克隆抗体单克隆抗体
抗血清成分复杂，应从中提取ＩｇＧ才可用于包被固相或酶标记。含单克隆
抗体的小鼠腹水中的特异性抗体含量较高，有时可适当稀释后直接进行
包被。制备酶结合物用的抗体的质量往往要求有较高的纯度。经硫酸铵
盐析纯化的ＩｇＧ可进一步用各种分子筛层析提纯。也可用亲和层析法提纯
特异性ＩｇＧ，如用酶消化ＩｇＧ后提取的Ｆａｂ片段，则效果更好。
包被
固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称
为包
被（coating）。1.抗原或抗体溶于缓冲液（最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）。2.加于ELISA板孔中在4℃过夜。３．包被后再用１％～５％牛血清白蛋白包被一次，可以消除这种干
扰。这一过程称为封闭（ｂｌｏｃｋｉｎｇ）。（封闭为可选步骤，
有利于降低本底值。）
包被好的ＥＬＩＳＡ板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。
４．
ELISA 使用宝典
