ELISA 使用宝典 - 图文 

酶标（ELISA）综述

张传锋

ELISA的发展

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent

Assay )的简称。自上世纪70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。

ELISA技术原理

１．２．３．４．

５．６．

抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（ｐｇ－ｎｇ／ｍｌ水平），并且重复性好。

以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶

对底

物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验

技术

ELISA的方法

1.2.3.

检测抗体的间接法双抗原/抗体夹心法

检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法

酶标的实验设计方法比较多，但是最常使用

比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间

ELISA 检测方法

1.2.

nnnn

Abs （吸收光）检测法荧光检测法

荧光强度（FI）荧光寿命（FL）荧光偏振（FP）

荧光共振能量转移（FRET）

3.

n

发光检测法

化学发光n生物发光

其中发光有分为快速发光法（闪光法）、慢速发光法（辉光法）