酶标(ELISA)综述
张传锋
ELISA的发展
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent
Assay )的简称。自上世纪70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
ELISA技术原理
1.2.3.4.
5.6.
抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。
以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶
对底
物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验
技术
ELISA的方法
1.2.3.
检测抗体的间接法双抗原/抗体夹心法
检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法
酶标的实验设计方法比较多,但是最常使用
比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间
ELISA 检测方法
1.2.
nnnn
Abs (吸收光)检测法荧光检测法
荧光强度(FI)荧光寿命(FL)荧光偏振(FP)
荧光共振能量转移(FRET)
3.
n
发光检测法
化学发光n生物发光
其中发光有分为快速发光法(闪光法)、慢速发光法(辉光法)
ELISA 使用宝典 - 图文
酶标(ELISA)综述张传锋ELISA的发展ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的简称。自上世纪70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。ELISA技术原理1.2.3.4.5.6.<
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