慢性阻塞性肺疾病稳定期患者呼出气冷凝液中分泌性白细
胞蛋白酶抑制剂的检测及其意义
李 晶1 张固琴2 王丽慧2
【期刊名称】中华肺部疾病杂志（电子版） 【年(卷),期】2014(007)003 【总页数】2
【关键词】【关键词】 肺疾病，慢性阻塞性； 呼出气冷凝液； 分泌性白细胞蛋白酶抑制剂 ·短篇论著·
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一种气道不完全可逆性气流受限为特征，累及各级支气管、肺泡以及肺血管的慢性炎症性疾病。活化的炎症细胞如中性粒细胞等不仅释放白三烯B4、白介素-6(interleukin-6, IL-6)等多种炎性细胞因子，同时还可释放弹力蛋白酶、基质金属蛋白酶等物质其可直接破坏肺组织的结构蛋白，导致肺组织病变如肺气肿等[1]。分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(secretory leukocyte protease inhibitor, SLPI)作为肺部最重要的蛋白酶抑制剂，是近几年国外关于COPD研究的热点之一。呼出气冷凝液(exhaled breath condensate, EBC)的收集和检测是一种简便易行、可以重复应、患者易耐受的肺部疾病检查方法，能够动态监测气道炎症状态，评估肺部疾病情况。本研究通过检测稳定期COPD患者EBC中SLPI水平，分析COPD稳定期患者肺组织局部是否存在蛋白酶-抗蛋白酶失衡，探讨SLPI在COPD发生发展中的作用。
资料与方法
一、临床资料
20例COPD稳定期患者为2013年7月至2013年10月期间在我院门诊或住院治疗的患者，其诊断均符合中华医学会呼吸病学会所制定的标准[1]，并排除其它严重心、肺、肝、肾等脏器严重疾病。对照组20例健康志愿者均为在我院体检的健康中老年志愿者。 二、EBC的收集
利用Ecoscrecn (Erich Jaeger Company) EBC收集仪采集COPD稳定期患者和健康对照者EBC。收集方法：受试者先平静休息15 min，生理盐水漱口，夹紧鼻夹、紧含口器不漏气，平静呼吸10 min后,收集冷凝液约2 ml，转移到冷冻管内，通氩气10 min(流量约350 ml/min)，待标本气体标准化后检测。 三、SLPI的检测
采用酶联免疫吸附法检测EBC中SLPI水平(试剂盒购于美国BIOLEGEND 公司，灵敏度<10 pg/L)。酶标仪为BioceIIHT2型酶联免疫检测仪，具体操作严格按试剂盒说明书进行。 四、肺功能检测
应用Peakman 8简易床边肺功能仪于收集EBC前检测肺功能，记录FEV1及FVC等参数，重复测定3次，取最大值，记录FEV1%pred、PEF及FEV1/FVC值等参数。 五、统计学方法
所得数据使用SPSS 17.0统计软件进行分析。COPD组与健康对照组SLPI测定值之间差异的比较，采用独立样本t检验；COPD组患者和健康对照组年龄比较，采用独立样本t检验；性别、吸烟比例之间差异的比较，采用χ2检验，
相关性分析采用Pearson直线相关；P<0.05表示差异有统计学意义。
结 果
一、两组间一般特征及EBC中SLPI浓度的比较
COPD组与健康对照组的年龄、性别、吸烟史差异无显著性意义，P>0.05。COPD组EBC中SLPI水平(418.7±67.5 pg/ml)高于健康对照组(275.5± 72.6 pg/ml)，两组之间差异具有统计学意义P<0.05，见表1。 二、COPD组患者肺功能与SLPI水平的相关性
COPD组EBC中SLPI浓度与患者FEV1占预计值%、PEF呈正相关，相关系数r分别为0.468、0.537，P均<0.05。
讨 论
目前多数学者认为弹性蛋白酶-抗蛋白酶失衡是COPD发生、发展的重要机制之一。中性粒细胞弹力蛋白酶(neutrophil elastase, NE)可分解人体的连接组织和蛋白聚糖，直接损伤肺组织的结构蛋白，导致肺气肿的形成。同时，NE还能促进气道上皮细胞释放炎性细胞因子如IL-8等，促进气道炎症的发生发展[2]。故NE被认为是肺脏炎性损伤级联反应的终末效应因子。目前人体中已发现多种NE的抑制剂，其中自然分布于支气管肺组织的NE抑制剂有3种，即α-抗胰蛋白酶-1、SLPI、Elafin。SLPI是一种嗜中性弹性蛋白酶阳离子抑制剂，主要来源于气道上皮细胞、Ⅱ型肺泡细胞分泌。
近年来SLPI在COPD发生发展中的作用已成为国内外的研究热点。Kersul等 [3]检测了17例COPD患者急性加重期及稳定期血清SLPI水平，结果显示COPD患者稳定期血清SLPI水平明显高于健康对照组，但COPD患者急性加重期血清SLPI水平与稳定期对比无显著差异。Pant等[4]对比24例AECOPD
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