缓冲盐
选择缓冲液的步骤
1 .确定最佳分离状态时的流动相pH
2 .选择具有与流动相pH相近的pKa的缓冲液(即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液)
3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收
(在波长210nm附近进行检测时,不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液)
46Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited缓冲盐
常用代表性的弱酸的pKa值
pK14.873.132.16
pK24.767.21
pK36.4012.32
醋酸柠檬酸磷酸
47Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited缓冲液
缓冲液的使用
μ使用前必须过滤
μ使用后一定要进行清洗,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:
用含5%甲醇的水溶液冲洗30min(1ml/min),再用甲醇冲洗30min
μ用纯水冲洗泵头清洗管路μ易受到细菌和霉菌的影响
不能直接用有机溶剂冲洗缓冲盐溶液48Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited流动相的更换
不互溶的流动相不能直接更换
缓冲盐不能直接用有机溶剂更换
水缓冲盐异丙醇水正己烷
49有机溶剂
Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited溶剂的黏度
?乙腈和甲醇…黏度
Water/methanol
-乙腈黏度低在相同流速时有较低的柱压Water/methanol
Pressure (MPa)-当和水混合时黏度有变化柱压也相应有变化Water/acetonitrile
Water/acetonitrile
Water (100%)Water/Organic solvent 1:1Organic solvent (100%)
50Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited
岛津操作培训 - 液相色谱基础知识 - 图文
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