原链: AAA TTT ATC CCC GAT GGG 目的基因:ATC CCC GAT 引物:TAG、GAT
TTT AAA TAG GGG CTA CCC TAG GGG CTA
第一次扩增: AAA TTT ATC CCC GAT GGG
TAG GGG CTA CCC
AAA TTT ATC CCC GAT TTT AAA TAG GGG CTA CCC
第二次扩增: TAG GGG CTA CCC
ATC CCC GAT TAG GGG CTA
AAA TTT ATC CCC GAT
第三次扩增: ATC CCC GAT
TAG GGG CTA ATC CCC GAT TAG GGG CTA
1、故,用PCR技术获取目的基因,至少三次才能得到目的基因(有两个)。
2、因为扩增三次后,仪器中共有五种DNA分子,所以需要通过电泳等手段,将目的基因与其他基因分层,再提取出。
3、若是单链进行此过程,亦是需三次才能得到一个完整的目的基因DNA分子。 ①AAA TTT ATC CCC GAT GGG ②TAG GGG CTA CCC ③ATC CCC GAT
TAG GGG CTA CCC ATC CCC GAT TAG GGG CTA
4、mRNA逆转录后,得到cDNA单链,若目的基因上无合适的限制酶切位点,可以不必用DNA聚合酶合成双链后再去苦寻合适的限制酶,而是用此方法直接获取目的基因
用PCR扩增要想得到目的基因,至少三次得目的基因
原链:AAATTTATCCCCGATGGG目的基因:ATCCCCGAT引物:TAG、GATTTTAAATAGGGGCTACCCTAGGGGCTA第一次扩增:AAATTTATCCCCGATGGGTAGGGGCTACCCA
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