标 题 文件编码 起 草 人 审 核 人 批 准 人 分发部门 LC-2010A HT型高效液相色谱仪 标准操作规程 SOP/QAS054 -2012 起草日期 审核日期 批准日期 版 次 执行日期 颁发部门 复制份数 第1版 质量保障管理中心 共1份 质量保障管理中心 目的:为检验人员提供LC-2010A HT型高效液相色谱仪标准的检验操作规程,保证工作质量。
范围:适用于LC-2010A HT型高效液相色谱仪的使用。
责任:质量保障管理中心检验员。
内容:
1.设备组成和工作条件
该仪器为集中一体化设计,主要由在线脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器及四元低压泵组成。
2.准备工作
2.1将色谱甲醇及流动相用0.45um滤膜过滤并脱气。
2.2对所进样品用0.45um滤膜过滤。
2.3检查色谱柱安装是否正确良好。
2.4检查泵、检测器、数据处理机的各个连接头连接是否正确良好。
3.开机
3.1启动稳压器电源
3.2电压稳定后,依次打开仪器电源及计算机。
4.泵、自动进样器和色谱柱的清洗
4.1打开“LCsolution”操作系统,点击“操作”项下“分析”标志,将仪器与计算机控制器连接。
4.2连接完成后,分析程序进入控制界面,同时,仪器显示进入系统控制面板。
4.3点击“F5”进入常规系统操作显示界面。在确认计算机控制器未启动仪器的情况下,打开泵头脱气阀,点击“purge”按钮,进入脱气清洗泵及自动进样器界面。依次点击“F1-F5”,对你所使用的泵及自动进样器进行脱气。脱气完成后,各个泵及进样器则会显示“fin”,否则则是“exe”状态。泵脱气完成后,会自动进入常规操作显示界面,此时表示脱气完成,可以将泵阀关闭,进行用前平衡色谱柱或是用前清洗。
4.4使用色谱柱前,用低流速纯有机相进行30min左右的清洗,清洗时,在分析界面的“简单设置”版面“模式”下拉菜单中,选择合适模式,如“低压梯度”或是“等浓度洗脱”。然后在“流速”一栏输入流速“0.3ml/min”,在“泵浓度”一栏输入“100”,表示所用有机相比例为100%,完成后点击“下载”方可使仪器正常运行。然后用流动相比例的有机相-水进行再次清洗30min(操作如上),然后可以更换流动相进行平衡色谱柱(更换流动相时,应注意流路中是否有气泡,若有,则需重复3.3的操作,待气泡完全排除后,方可继续)。
5.实验条件的设定
5.1用流动相平衡色谱柱时,可根据实际情况,将流速逐渐升至所需流速,通常所使用的流速为1.0ml/min、1.2ml/min、0.8ml/min。
5.2检测器波长及检测时间选择。在“简单设置”操作版面中,“检测器A”项下“波长通道1”一栏输入你所需的检测波长“X”,“结束时间”一栏输入你所需检测时间“X”,点击“下载”即可。
5.3柱温的选择。在“简单设置”操作版面中,“柱温”项下“温度”一栏输入你所需检测温度“X”,点击下载即可。
6.基线检查
待仪器运行参数设定完成后,平衡约30min左右后,查看基线是否为直线且稳定,若是,则可进样,否则,继续平衡。
7.试验方法确定
7.1将处理后的样品放入样品盘,记录相应的盘号及位置。
7.2点击“数据采集”项下“单次运行”按钮,在此介面输入相关信息,如“文件保存路径”,“样品信息”,“样品位置”等。输入完毕后,点击“确定”,进行方法确认。
7.3待此次运行结束时,点击“LCsolution”项下“再解析”按钮,打开在解析界面,找到前次运行记录的色谱图,进行数据处理。点击数据分析界面下“向导”按钮,进行积分参数设定,设定完成后,点击“下一步”进行数据峰的选择,再点击“下一步”,直至完成“向导”。然后双击此文件,保存当前设置后,点击“文件”项下“方法另存为”,进行方法保存。