7.2 28.0 72.0 7.3 23.0 67.0 7.4 19.0 81.0 7.5 16.0 84.0 7.6 13.0 87.0 7.7 10.5 89.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7.0 93.0 8.0 5.3 94.7
关于磷酸缓冲溶液的知识,我在网上搜索了好多帖子,但是还是不能确定正确的答案。现在把他们链接过来,希望有高手们参与讨论,我会把最终的正确解答整理出来,提供给大家。
PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是
1.磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、 2.磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及 3.磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),
其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。 如无特殊说明,生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)。
无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS) (0.15Mol/L PH 7.2) NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g
(如为Na2HPO4·12H2O,则为2.89g) KH2PO4 0.2g
将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中,完全溶解后,115℃高压灭菌10min~15min,存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。 我们用的都是第二种
问题1:磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered sodium),为什么用第三种或第一种呢:
这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液,其他两种说法的英语名称常见到,不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。
我们公司用的PBS有很多种,抗体组用的中和PBS配方就比较简单,没有K+离子, 只起到缓冲PH的作用;Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混匀,可以得到不同PH的缓冲液,用于不同目的,这个在分子生物学中用得很多; 用于活细胞或者细菌处理的,为了保持渗透压,会加入其他的溶液,最常见的就是NaCl 和 KCl调节
离子浓度。以上是个人的理解,欢迎批评。:
问题2:既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用,那加入80G的NACL作用是什么?需要平衡渗透压吗?还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊,血清里面又没有细胞,何来NA-K泵一说啊?
我觉得之所以这么配,其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了,血清里面又没有细胞,何来NA-K泵一说啊? 我没说血清撒。。。。。。 我们用的又没加K,我是说加了K的的 问题3:不加NACL会怎么样啊?多省钱啊
在中和磷酸盐缓冲液中,NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度,以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下,蛋白质都会变性,抗体当然不例外。
ps:哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。称取0.9克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到100毫升。
鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。称取0.75克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。
两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。称取0.65克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。[/size][/font]