PBS缓冲液配方
不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。 我们实验室的配方: A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:
磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。 B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。 或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液 (ml) -- B液(ml) 5.60 -- 9.50 -- 0.25 5.91 -- 9.00 -- 1.00 6.24 -- 8.00 -- 2.00 6.47 -- 7.00 -- 3.00 6.64 -- 6.00 -- 4.00 6.81 -- 5.00 -- 5.00 6.98 -- 4.00 -- 6.00 7.17 -- 3.00 -- 7.00 7.38 -- 2.00 -- 8.00 7.73 -- 1.00 -- 9.00 8.04 -- 0.50 -- 9.50
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4?2H2O(磷酸二氢钠)Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水 各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先
配
0.2M PB (pH=7.4
,
100ml)
:
取
19ml 0.2mol/L
的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 : pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92 8 5.9 90 10 6.0 87.7 12.3 6.1 85 15 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51 49 6.9 45 55 7.0 38 62
7.1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 0.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7 93 8.0 5.3 94.7
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB),磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB) 试剂: NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml
溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 90.0 10.0 6.0 87.7 12.3 6.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51.0 49.0 6.9 45.0 55.0 7.0 39.0 61.0 7.1 33.0 67.0