血液标本放置时间对血清NSE测定的影响

血液标本放置时间对血清NSE测定的影响

谷秀娟1,谷玉龙2,周 军3

【摘 要】摘 要:目的 探讨标本放置不同时间后分离血清对神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定的影响。方法 采用电化学发光免疫检测法,血液标本分别放置 1 h、2 h、3 h、4 h时离心分离血清;标本放置 1 h时离心所得血清分别于-20℃冷冻和 4℃冷藏 24 h再测定,观察 NSE含量的变化。结果 1 h组、2 h组、3 h组、4 h组、冷冻组、冷藏组测得 NSE中位数分别为 12.91 μg/L、15.04 μg/L、15.69 μg/L、20.53 μg/L、12.42 μg/L、15.72 μg/L,1 h组与 2 h组、3 h组、4 h组、冷藏组比较有显著性差异(P＜0.05),与冷冻组比较无显著性差异(P＞0.05)。结论 标本放置时间过久对NSE的测定结果影响显著。 【期刊名称】延安大学学报（医学科学版） 【年(卷),期】2010(008)003 【总页数】2

【关键词】关键词:神经特异性烯醇化酶;放置时间;电化学发光法

神经元特异性烯化酶(neuron specific enolase,NSE)以二聚体的形式存在,由三种亚单位α、β、γ组成。二聚体烯醇化酶αγ、γ γ称为 NSE或γ-烯醇化酶,主要存在于神经组织、神经内分泌细胞和这些组织来源的肿瘤组织中。小细胞肺癌具有神经内分泌特征,NSE作为小细胞肺癌最有价值的肿瘤标志物应用于临床,在诊断、疗效监测、预后甚至肺癌病理类型预测方面具有重要意义[1-2]。在日常工作中发现,一部分病房标本NSE水平明显升高,排除仪器和试剂因素外,标本因素特别是标本抽取后未能及时送检,可能是造成检测结果误差的主要原因。本文就此进行深入探讨,旨在了解标本放置时间对 NSE测定结果的影响程度及发

现解决问题的方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本选择 20名志愿者,其中健康体检者 25名和小细胞肺癌患者 4名,年龄在 19～69岁之间。规范采集空腹静脉血适量,分别置于 4个试管中。第一管在室温(25℃)放置 1 h时离心,为 1 h组;第二管在室温放置 2 h时离心,为 2 h组;第三管在室温放置3 h时离心,为3 h组;第四管在室温放置 4 h时离心,为 4 h组;将 1 h组每份血清分装离心管分别放置 4℃冷藏和-20℃冷冻 24 h后测定,为冷藏组和冷冻组。冷冻组血清需全部冻融并充分混合均匀后进行测定。所有标本均无溶血。

1.1.2 试剂与仪器 Roche公司生产的Elecsys2010全自动电化学发光仪,Roche公司 NSE测定试剂盒及其配套标准液、质控品。试验前进行质控品测定并在控。 1.2 统计方法

采用 SPSS18.0版本统计软件处理,组间NSE浓度比较采用非参数独立样本秩和检验,结果用中位数、最大值、最小值表示。

2 结果

标本放置不同时间 NSE水平(μg/L)比较(见表 1)

3 讨论

NSE是生物体内糖酵解代谢的关键酶,多以二聚体形式存在。在神经内分泌细胞如松果体、垂体、甲状腺等组织的细胞及血液中的红细胞和血小板有大量的 γ亚基存在[3]。神经元和神经内分泌来源的恶性肿瘤和小细胞肺癌患者显著升高,是此类肿瘤常用标志物,因此在临床应用非常广泛,可作为肿瘤标志物用于神经母

细胞瘤、小细胞肺癌、垂体瘤等疾病的诊断[4],也可作为神经元损伤的标志物。 NSE检测方法主要有酶联免疫吸附试验、放射免疫分析法、电化学发光法等。检验结果的准确性除受其方法灵敏度、精密度的影响外,来自标本自身的影响是不容忽视的重要因素[5]。电化学发光免疫法(ECLI A)是检测 NSE特异、敏感的方法。我们应用NSE试剂说明书中强调必须使用血清标本,且标本离心须在 1h内完成。但在实际工作中,检验项目申请、患者准备、原始标本的采集、运送到实验室等工作是由实验室以外工作人员完成的,实验室工作人员很难控制,而标本的质量是准确检验结果的基础。由于这些检验前不可控因素的影响,同一患者检查结果出现显著差异时有发生。

我们的结果显示,标本采集后 1 h、2 h、3 h、4 h分离血清测得NSE中位数分别为12.91 μg/L、15.04 μg/L、15.69 μg/ L、20.53 μg/L,有逐渐升高趋势。1 h组与 2 h组、3 h组、4 h组比较有显著性差异(P＜0.05),说明随着标本放置时间的延长,血液中的红细胞和血小板代谢产生NSE,引起检测结果增高,与邵美娟等[4]所述观点一致。1 h组与冷冻组、冷藏组测得 NSE中位数分别为 12.91 ug/L、12.42 ug/L、15.72 ug/L,冷冻组与 1 h组测得值相近,冷藏组与 2 h组、与3 h组测得值相近。1h组与冷藏组比较有显著性差异(P＜0.05),与冷冻组比较无显著性差异(P＞0.05),提示冷冻对 NSE活性影响不大,建议采用冷冻保存血清标本。2h组与 3 h组、4 h组比较无显著性差异(P＞0.05),说明标本放置时间超过 2 h,则对NSE检测结果已有较大影响。

综上所述,NSE检测极易受标本放置时间影响,应引起检验人员和医生的高度重视。全血标本放置时间过久会因血液中细胞代谢,影响血清中的成分,易出现水分蒸发及轻微溶血现象,影响检验结果的真实性和准确性。我们建议NSE检测应