多药耐药基因转染的脐血细胞对白血病小鼠化疗的骨髓保护作用

多药耐药基因转染的脐血细胞对白血病小鼠化疗的骨髓保

护作用

安淑华;金先庆;解启莲;康权;王佚;甄素芬

【期刊名称】《中华血液学杂志》 【年(卷),期】2005(026)002

【摘要】目的探讨转染多药耐药(mdr1)基因的脐血单个核细胞(MNC)对急性髓系白血病小鼠的骨髓保护作用及疗效.方法通过逆转录病毒介导的方法将含有人全长cDNA mdr1基因导入脐血MNC,即逆转录病毒上清液与脐血MNC体外共培养;将接种人髓系白血病细胞系(HL-60细胞)的SCID小鼠分成3组:A组(观察组)经鼠尾静脉注射转染mdr1的脐血MNC 2×106/只,共2次;B、C两对照组小鼠以同样剂量、方法分别注射未转染mdr 1的脐血MNC和等容积的生理盐水.3组白血病SCID小鼠在每周递增高三尖杉酯碱剂量化疗下,通过检测小鼠外周血白细胞数、瘤细胞阳性率、组织病理和HL-60细胞表面抗原(CD33)等观察转基因小鼠和对照小鼠对抗癌药物的耐受性及抗肿瘤疗效.同时分别采用PCR技术、免疫组化方法和柔红霉素排出试验检测mdr1基因在小鼠体内的表达和功能.结果①体外成功地将mdr1基因导入脐血 MNC,转染率达30%左右;②用HL-60细胞2×106接种于经亚致死量照射的SCID小鼠可成功制成白血病动物模型;③采用程序性移植转基因细胞方法成功建立了mdr1转基因脐血细胞移植小鼠模型,并可作为白血病临床前期体内评价mdr1基因保护骨髓作用;④转基因脐血细胞移植小鼠对高三尖杉酯碱耐受性高于正常剂量的5～6倍,外周血白细胞维持在3.0×109/L左右,外周血涂片瘤细胞降至5%以下,病理切片主要脏器未见瘤细胞,CD33+细胞率低于5%,证明进行转基因脐血细胞移植的白