伏马菌素B1免疫学检测方法的研究
许金俊;陈飞;秦爱建;陶建平;彭金彪;邵红霞;金文杰;戴先礼
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2007(023)011
【摘要】目的 制备抗伏马菌素B1(Fumonisin B1,FB1)单克隆抗体,在此基础上建立一种可用于定量检测玉米中FB1含量的间接竞争ELISA方法.方法 人工合成免疫原BSA-FB1和包被抗原OVA-FB1,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞融合技术制备抗FB1的单抗,并对其特性进行鉴定.以OVA-FB1作为包被抗原,FB1为竞争抗原,两者与一定量的抗FB1单抗竞争反应,建立检测FB1的间接竞争ELISA方法,对玉米样品进行初步检测应用.结果 获得了1株稳定分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞(命名为5H12-C6-C2).对间接竞争ELISA方法进行反应条件优化后,建立了检测FB1的标准曲线,回归方程为y=1.113-0.313x,相关系数R2为-0.990,最适可测范围为10ng/ml~1000ng/ml,灵敏度为90.88 ng/nl,最低检测限为7.83 ng/ml,方法的批内和批间平均变异系数分别为3.24%和2.45%,样品添加平均回收率为94.32%.结论 成功地制备了抗FB1特异性单抗,建立了FB1的间接竞争ELISA检测方法,为进一步研制FB1检测试剂盒奠定了基础.
【总页数】5页(1118-1122)
【关键词】伏马菌素B1;单克隆抗体;间接竞争ELISA;检测
【作者】许金俊;陈飞;秦爱建;陶建平;彭金彪;邵红霞;金文杰;戴先礼
【作者单位】扬州大学兽医学院,扬州,225009;张家港出入境检验检疫局;扬州大学兽医学院,扬州,225009;扬州大学兽医学院,扬州,225009;扬州大学兽医学院,