～2min，倒出提取液，静置3～5min,待用。 5.2仪器参数设定
依次打开外部电源(如稳压器)、主机电源。当打开仪器电源时，仪器便自动进入自检程序，自检各项都“OK”后，自动进入选择工作方式界面；预热半小时后,可进行以下操作。
按①，进入光度测量工作方式
按GOTOλ键，输入412nm波长值,按ENTER确认。
1键，选择测光方式“Abs”按F1键进行参数设置：按○，按RETURN键退出。 按F3进入试样池界面，按①选择多联池，按②选择多联池数，设定试样池数为2，按③键设定空白溶液校正为“不要”；按④键，设定试样池空白教正为不要；按RETURN键退出。
5.3样品测量
于试管中加入2.5ml缓冲溶液，再加入0.lml酶液，0.1ml显色剂，这是对照溶液；
于试管中加入2.5ml样品提取液，再加入0.lml酶液，0.1ml显色剂，这是测试溶液。
将对照溶液和测试溶液，分别摇匀后于37C恒温箱中放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。
加入0.lml底物振荡，此时溶液开始显色反应，将对照溶液和测试溶液分别放入仪器比色池1、2中，
按F2键，按START\\STOP测量吸光度，分别记录对照溶液A0和测试溶液A样
3分钟后再按START\\STOP测量吸光度，分别记录对照溶液A01和测试溶液品0，A样品1
完成所有样品测量后可用↑，↓进入查询状态，逐行查询测量结果。
o
6
6结果的表述计算 6.1结果计算
检测结果按公式计算：
抑制率（%）?[（A0－A01）－（A样品0－A样品1）]÷（A0－A01）?100% 6.2结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。抑制率≥50%的样品需要重复检验2次以上。 抑制率≥70%时，蔬菜中肯定存在有机磷或氨基甲酸酯类农药。 对抑制率≥50%的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 7附则
7.1酶抑制法技术指标 7.1.1灵敏度指标
酶抑制率法的最低检测限应达到以下指标：甲胺磷0.8mg/L，敌百虫0.25mg/L,呋喃丹0.002mg/L。 7.1.2符合率
在检出的抑制率≥50%的10份以上样品中，经气相色谱法验证，符合率应在80%以上。
农药浓度与抑制率对照表（实验条件：37℃）
甲胺磷 浓度(μg/ml) 抑制率 浓度(μg/ml) 抑制率 浓度(μg/ml) 抑制率 浓度(μg/ml) 抑制率
7
0.4 35.0 0.4 26.4 0.1 13.6 0.001 25.2 0.8 52.0 0.6 29.4 0.15 22.9 0.002 50.3 1.6 69.0 0.8 1.2 1.6 3.75 氧乐果 36.7 52.7 59.6 76.3 0.2 0.25 0.4 0.5 敌百虫 37.2 50.6 63.9 73.9 0.003 0.004 0.006 0.008 呋喃丹 58.8 66.8 73.2 78.9
国内外农药残留量最高限量标准
有机磷与氨基甲酸脂类农药 WHO/FAO的JMPR规定每日每公斤体重允许摄入量(ADI)ug/Kg?bw EPA规定每日每公斤参照摄入量(RfD)mg／Kg 毒性（雄性大鼠经口LD50）mg／Kg 国外每人每天实际摄入量ug/60Kg 国内每人每天实际摄入量ug/60Kg CCPR规定蔬菜农药残留量允许限量（MRL）mg／Kg 国内规定蔬菜农药残留量允许限量（MRL）mg／Kg 甲胺磷 4 氧乐果 0．3 甲萘威 10 敌百虫 10 0.05 20～30 0.936 23．9 0.5～1 50 0．3375 0．5 5 8～14 0．006 0．1 560 2．9
8说明
韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒、胡罗卜等蔬菜中，含有破坏酶活性的物质，处理这类样品时，不要剪的太碎，浸提时间过长，必要时可采取整株蔬菜浸提。
8
蔬菜农药残毒快速检测方法工程流程图
取样→
剪成1cm大小碎片→ 混匀→
称取1g（非叶菜类取2g）→ 加5mL缓冲液→ 振荡2min→ 静置5min→
取2.5mL样品提取液，加0.1mL酶溶液，0.1mL显色剂→ 振荡0.5min→
放入37℃恒温箱15分钟→ 加入100μL底物→ 振荡0.1min→
倒入比色池，用TU1800测吸光度→ 三分钟后再测吸光度→ 计算抑制率→
根据抑制率进行结果判定
9
蔬菜农药残毒快速检测原始记录
样品名称 取样地点 重复次数 样品质量 提取液体积 浸取时间 分取体积 酶液体积 显色液体积 反应时间 底物体积 对照吸光度 样品吸光度 3分钟后对照吸光度 3分钟后样品吸光度 抑制率 平均值 结论 备注 检测人：
10
样品编号 一 检测日期 取样日期 二
硝酸盐的测定方法
1范围
本标准规定了蔬菜中硝酸盐含量的测定方法。
本标准适用于蔬菜中硝酸盐含量的测定。 2原理
样品用pH＝9.6的氨缓冲液提取硝酸根离子（NO3－），同时加活性炭去色素类，然后用硫酸锌和亚铁氰化钾沉淀蛋白及其他干扰物质，过虑，得到无色透明的提
紫外分光光度计在蔬菜农药残留检测中的应用
