免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用
陈慧丹，王友基
【摘 要】摘要:目的探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用。方法 对48例M蛋白血症患者进行琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)和免疫球蛋白定量检测。 结果 在48例患者中有47例IFE检出M蛋白，M蛋白分型为IgGκ型14例,IgGλ型10例,IgA κ型3例,IgAλ型5例,IgMκ型3例,IgMλ型2例,单纯κ型1例，单纯λ型9例；免疫球蛋白定量仅有 33例异常。结论 IFE法灵敏度高，对MM的诊断和分型有重要意义。 【期刊名称】实验与检验医学 【年(卷),期】2013(000)006 【总页数】2
【关键词】关键词:免疫固定电泳;M蛋白；多发性骨髓瘤；免疫球蛋白
M蛋白是由浆细胞或B淋巴细胞单克隆性恶性增殖而产生一种大量的异常免疫球蛋白。恶性M蛋白血症多见于多发性骨髓瘤(lgG型、lgA型和轻链型)、巨球蛋白血症(lgM型)及恶性淋巴瘤，它们都是以M开头的疾病，故称为“M蛋白”。多发性骨髓瘤(MM)是M蛋白病中最常见类型，在中国的年发病率约为十万分之一，占所有恶性肿瘤的1%，(在恶性血液系统疾病中占有10%)[1]，随着人口的老龄化，特别是城市人口进入了老龄化，其发病率有逐年增高的趋势[2]，对人们的生命和生活质量构成了越来越严重的威胁。本文对48例M蛋白血症患者的免疫固定电泳(IFE)和免疫球蛋白定量检测结果进行比较分析，说明免疫固定电泳对M蛋白的诊断和分型有具重要意义。
1 材料与方法
1.1 标本来源 2012年1月至9月本院门诊及住院43例多发性骨髓瘤和5例巨球蛋白血症 (均符合国内诊断标准[3])共48例M蛋白血症患者，年龄在 47~89岁(中位年龄 64岁)，男30例，女 18例;免疫球蛋白正常对照组采用的是健康体检者35例，年龄在40~88岁，男20例，女15例。
1.2 试剂与方法 免疫固定电泳采用法国Sebia公司试剂盒及配套抗体；免疫球蛋白定量测定采用德灵BNⅡ仪器及配套试剂,均严格按仪器说明书进行操作。 1.3 结果统计 结果采用SPSS 18.0统计软件进行统计。
2 结果
2.1 免疫固定电泳的结果判读 正常阴性样本的沉淀带呈弥散分布，见图1。异常阳性样本则出现界限分明、狭窄且浓染的沉淀带(即M带)；重链或轻链的M带应与蛋白电泳的M带位处于同一水平，呈现“镜影式”分布，见图2。 2.2 免疫固定电泳分型结果 48例M蛋白血症患者经免疫固定电泳有47例检出M蛋白，1例未检出M蛋白，阳性符合率为97.9%，而免疫球蛋白定量只有33例异常，阳性率为68.8%。47例IFE法检出M蛋白的具体分型见表1。从表1可见多发性骨髓瘤(lgG型、lgA型和轻链型)最多见有42例，占89.4%，其中lgG型百分比最高，达51.06%。
2.3 M蛋白血症患者血清中免疫球蛋白定量结果47例IFE阳性的M蛋白血症患者免疫球蛋白定量结果见表2。
2.4 47例IFE阳性患者入院初诊断结果 对47例IFE阳性患者病例资料分析显示，由于M蛋白血症临床表现多样，首发症状可表现为肾脏损害、骨折、感染、高钙血症等症状，常因此而就诊于各科。随着医务工作人员对M蛋白血症认识的提高，对大多数患者都能及时收住血液科。见表3。
3 讨论
多发性骨髓瘤MM是一种最常见的单克隆骨髓浆细胞恶性增殖性疾病。本文中48例M蛋白血症患者经免疫固定电泳有47例检出M蛋白，阳性符合率高达97.9%，分型以lgG型居多；其中检测到1例无M带的MM患者,其血清免疫球蛋白、轻链含量也正常,可考虑为未分泌型MM；由于各分型有其相应的特殊临床表现和不同的预后，根据不同的免疫固定电泳分型结果，可以指导临床医生选择更适合患者的个体化治疗方法，以达到缓解病情或治愈的目的。从表2可以看出lgG型组lgG含量明显升高，lgA、lgM含量明显下降；lgA型组lgA含量明显升高而lgG、lgM含量明显下降；10例单纯轻链型MM病人lgG、lgA、lgM均低于正常，可能是高浓度异常M蛋白通过反馈机制抑制正常免疫球蛋白的合成。实验中我们还注意到，有4例患者经过治疗，其血液中M蛋白逐渐消失，临床症状缓解，说明IFE可用于病情监测及预后判断。此外，由于目前MM一般通过X线摄片、组织活检、骨髓涂片来确诊，可细胞形态学检查往往要在患者多部位进行多次穿刺，且瘤细胞＞10%才可诊断，加重患者负担，而IFE对单克隆球蛋白的检出敏感度为5～10mg/L，因此在诊断MM时比骨髓细胞形态学检查更具有早期诊断价值[4]。总之，当临床观察提示有疑诊病例，或出现白／球蛋白比例明显倒置、高蛋白血症时应进行免疫固定电泳分析[5]。
1969年Alper使用IFE法进行蛋白多态性的研究，经过多年的发展现在IFE被广泛应用，它包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程,是目前临床实验室用于对患者血清M蛋白鉴定与分型的常规检测方法,具有检测周期短、特异性好、灵敏度高、分辨率强，结果易于判读，制成的胶片可长期保存等优点[6]。
免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用
