66份芒果种质性状评价及亲缘关系的ISSR分析
本研究通过对海南、云南和广西芒果种质资源的调查、收集了20多份野生、半野生和地方芒果品种种质资源并保存在农业部儋州芒果种质圃,完成了66份野生、半野生、地方品种和主栽品种芒果种质资源的性状描述评价研究.同时运用ISSR分子标记技术,从基因组DNA水平进行了种质聚类和亲缘关系分析研究,其主要结果如下：1、参照IPGRI、UPOV、陈业渊等制定的芒果种质资源描述符或标准,结合实际,对66份芒果种质的主枝与主干夹角、叶长、叶宽等共计22个主要生物学性状指标进行了分析和评价,并对其中18个重要性状指标进行了分级或分类。评价发现扁桃芒、野芒1、昌江002和普通芒果区别较大,主要表现在扁桃芒叶片狭长披针形,叶形指数很大；野芒1叶片长圆披针形和长椭圆形,叶片长,叶片很宽,叶形指数小；昌江002叶片长椭圆形,叶片特宽,叶形指数很小。2、利用正交设计、单因子因素设计优化了芒果ISSR的反应体系,其最佳反应体系为：总体系为25μ1,含有10×buffer 2.5μ1,模板DNA 25ng,dNTPs 0.3 mmol·1-1,Mg2+2.0mmol·1-1,引物0.32μmol·1-1及Taq酶1.25U。
利用优化的反应体系筛选出20条适合于芒果ISSR分析的引物。3、利用筛选的引物对66份芒果种质进行了亲缘关系研究,共计扩增166条带,平均每条引物8.3条,多态性条带比率为95.0%,种质材料之间的遗传相似系数在
0.395-0.882之间,平均值为0.627。利用软件进行聚类分析,结果表明金穗和那坡001亲缘关系近,而广西土芒与Kyo Savoy亲缘关系最远。
4、通过对聚类图及种质间的遗传相似系数进行分析,66份芒果种质基本能被区分开,以0.66为阈值可以分成12大类,以0.72为阈值又可把第一类分成8个组。5、聚类结果表明野生、半野生种质覆盖了各个类群,半野生种质存在少数
几个类群里,而栽培种质几乎全部集中在同一个类群中,遗传相似系数也逐渐变小,说明野生、半野生到栽培芒果基因型逐渐趋向单一,遗传多样性水平逐渐降低。
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