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葛根总黄酮提取物的含量测定研究

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葛根总黄酮提取物的含量测定研究

李婷,郑彩美,张彤,陶建生

【摘要】 目的测定葛根提取物中有效成份葛根素及总黄酮的含量。方式采纳高效液相色谱法对其中的葛根素进行含量测定;采纳紫外分光光度法对其中的总黄酮进行含量测定。结果葛根素含量在 536~ 6 μg范围时与峰面积呈良好线性关系(r= 97),加样回收率为%,RSD为%;总黄酮的线性范围为~ μg·ml-1(r= 55),加样回收率为%,RSD为%。结论所成立的分析方式简便、准确、靠得住,重复性好,可用于葛根提取物中葛根素和总黄酮的测定。

【关键词】 葛根提取物; 高效液相色谱法; 紫外分光光度法

Abstract:ObjectiveTo determine the contents of puerarin and total flavonoids in extracts of Pueraria labta (Willd.) Ohwi. MethodsHPLC was established to determine puerarin, and UV was established to determine total flavonoids in extracts of pueranva Labta. ResultsThe results of HPLC quantitative analysis showed that the linear range of puerarin was 536~ 6 μg(r= 97), and the recovery rate was %, RSD=%; the results of UV quantitative analysis showed that the linear range of total flavonoids was ~ μg·ml-1(r= 55), and the recovery

rate was %, RSD=%.ConclusionThis method is convenient, accurate, reliable with good reproducibility, so it can be used to determine the contents of puerarin and total flavonoids in extracts of Pueraria labta (Willd.) Ohwi.

Key words:Extracts of Pueraria labta (Willd.) Ohwi.; HPLC; UV

葛根为豆科植物野葛Pueraria labta (Willd.) Ohwi的干燥根,是经常使用中药材,具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻功效,用于外感发烧头痛、项背强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压颈项强痛等[1]。现代研究证明,葛根中的要紧有效成份为葛根素等异黄酮类化合物,具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用,同时也有降低血压的作用[2]。本研究在课题组前期研究的基础上,采纳水提-壳聚糖澄清-大孔树脂纯化的工艺[3]制备葛根总黄酮提取物,不仅去除杂质,而且保留了药材中的有效成份,取得的葛根总黄酮纯度大于60%。而且依照确信的工艺进行3批中试放样。结果说明,中试工艺条件稳固。为有效操纵产品质量,采纳高效液相色谱法对其葛根素含量进行了测定,采纳紫外分光光度法对其葛根总黄酮含量进行了测定,为成立葛根总黄酮提取物(有效部位)的质量标准奠定基础。

1 仪器与材料

Aglient 1100高效液相色谱仪(G1314A型VWD检测器,Agilent ChemStation色谱工作站),HP8453E紫外-可见分光光度计(中国惠普),XS105DU型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)。

葛根素对照品(批号: 中国药品生物制品检定所),葛根总黄酮提取物(中试产品 批号:0511,0605,0802),甲醇为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。

2 方式与结果

葛根素的含量测定

色谱条件与系统适用性实验色谱柱为Kromasil C18 柱 mm× 250 mm,5 μm);流动相为甲醇-水 (26∶74);流速 ml/min;柱温30℃;检测波长250 nm;进样量20 μl。按上述条件进行含量测定,此条件下,葛根素能与其它组分达到基线分离,与相邻的色谱峰分离度大于,保留时刻适中。阴性对照溶液对其含量无干扰。葛根素峰理论塔板数均不小于3 000。结果见图1。

对照品贮备液配制周密称取葛根素对照品 mg置25 ml量瓶

葛根总黄酮提取物的含量测定研究

葛根总黄酮提取物的含量测定研究李婷,郑彩美,张彤,陶建生【摘要】目的测定葛根提取物中有效成份葛根素及总黄酮的含量。方式采纳高效液相色谱法对其中的葛根素进行含量测定;采纳紫外分光光度法对其中的总黄酮进行含量测定。结果葛根素含量在536~6μg范围时与峰面积呈良好线性关系(r=97),加样回收率为%,RSD为%;总黄酮的线性范围为
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